血吸虫及其虫源性分子对小鼠胶原性关节炎Th细胞的免疫调节

类风湿性关节炎（RA）是一种严重危害人类健康的慢性自身免疫性疾病，该病发病率和致残率高，目前仍无有效的治疗方法。研究表明，CD4+效应T 细胞和调节性T 细胞免疫失衡参与RA发病的各个环节，RA的致病与Th1/Th17密切相关。日本血吸虫感染可诱导强烈的Th2优势应答，有报告显示血吸虫感染可减轻1型糖尿病动物的血糖水平。本项目试图利用血吸虫感染和血吸虫抗原诱导的Th2免疫偏移来恢复RA失衡的Th免疫应答。用CIA鼠构建血吸虫感染的RA模型，观察CD4+T细胞各亚群的网络调节，研究DC在指导血吸虫诱导Th2免疫偏移中的作用，探讨RA的发病、转归及免疫抑制性的治疗作用；用蛋白质组学技术分离并克隆表达虫源性免疫调节分子，通过体外验证其诱导Th2免疫极化的效果和体内观察其对RA发生发展及转归的影响，旨在筛选出特异性抑制RA过度的Th1/Th17免疫应答的新型免疫调节剂。此类研究国内外未见报道。

本项目基于“日本血吸虫感染蠕虫感染能激发强烈的Th2 免疫应答，可以改善Th1 介导的自身免疫性疾病”的假说，采用活虫感染、血清蛋白质组学技术与2-D电泳相结合，首次研究发现：. 1) 预先感染单、双性日本血吸虫均可抑制CIA小鼠关节炎症状，减少发病率。其机制与慢性血吸虫感染抑制淋巴细胞增殖；促进全身性的Th2优势应答，抑制炎症关节局部致Th1和Th17，抑制破骨细胞分化，降低骨关节损害程度；诱导自身抗体的类别转换有关。. 2) 日本血吸虫感染对CIA的抑制作用依赖于Th2优势应答的预先建立，使致病性的Th1免疫应答不能有效启动；血吸虫感染不能作为“治疗性”的干预措施用于改善CIA。. 3) 日本血吸虫虫体抗原亦可诱导Th2优势应答，虫卵沉积可能是诱导Treg，抑制Th17应答的主要刺激。日本血吸虫体与虫卵中均有可以抑制自身免疫性疾病的免疫调节分子。. 4) 慢性血吸虫感染可诱导宿主全身性的Th2优势应答，其中Tim-2作为负反馈通路中的分子在限制血吸虫感染诱导的Th2优势应答中起重要作用；慢性感染可诱导宿主galectin-9/Tim-3信号通路激活，并藉此诱导Th1细胞凋亡。因此，Tim2上调和galectin-9/Tim3通路的激活对血吸虫感染诱导的Th2优势应答的精密调节起着重要作用。. 5) 利用血清蛋白质组学技术从日本血吸虫中筛选出30多个具有免疫反应性的蛋白点，与同源的2-DE凝胶匹配并克隆表达出果糖二磷酸醛缩酶(rSjLAP)、亮氨酸氨基肽酶(rSjFBPA)、鸟氨酸氨基转移酶(rSjAAW)和亲免素（rSjIP）等虫源性分子。初步研究表明rSjFBPA和rSjAAW均有可能促进Th2免疫应答。. 6) 在诊断评估中的ELISA结果显示，rSjLAP和rSjFBPA是两个有用的血吸虫感染诊断候选分子，rSjLAP对急性和慢性血吸虫病的敏感性分别达到了97.4%和87.5%，rSjFBPA对急性和慢性血吸虫病的敏感性也分别达到了94.7%和88.5%，两个重组抗原的诊断特异性分别达到了94.7％和85.4%。本部分结果表明rSjFBPA和rSjLAP可作为血吸虫病诊断的候选分子。. 上述结果为揭示血吸虫感染诱导的宿主免疫耐受的分子机制、虫源性抗炎药物的研发以及血吸虫病诊断试剂、疫苗的开发提供了新思路。