仿刺参补体C3、Bf、H基因遗传多态性与抗病相关性研究

仿刺参是北方沿海的重要增养殖品种，但是由细菌等病原引发的池塘养殖仿刺参大范围病害影响了仿刺参养殖产业的健康发展。补体系统作为动物体内免疫防御反应的重要组分，在免疫防御和免疫调节中发挥着重要作用。本项目在前期开展的工作基础上，克隆仿刺参补体C3、Bf和H基因，并获得上游调控区序列，筛查单核苷酸多态位点（SNPs）；利用已经分离的仿刺参"腐皮综合症"致病菌对健康个体进行感染，对感染前后C3、Bf和H基因在各组织的表达差异进行检测，并对这些基因在病原感染后得到的抗病和易感群体组织中的表达差异进行分析，同时检测抗病和易感群体的多态性；对补体不同表达水平的体腔液溶菌、溶血活性进行检测和分析，解析补体的免疫调节作用以及C3、Bf和H基因的表达水平与"腐皮综合症"发生的关系；对C3、Bf和H基因的多态性与仿刺参抗病力的相关性进行统计分析，筛选仿刺参抗病分子标记，研究不同基因型的仿刺参的抗病分子遗传基础。

本项目在前期已经建立的仿刺参cDNA文库的基础上，克隆了仿刺参补体C3、Bf和H基因的全长cDNA序列，进行了基因的结构和进化分析，仿刺参补体存在2个C3基因，2个Bf基因，并且都具有高度的多态性；对这些基因在仿刺参从受精卵到成体的不同发育阶段、不同组织以及LPS刺激后的体腔细胞中的表达规律进行了分析；筛查了这些基因单核苷酸多态位点（SNPs），并进行了验证；对C3和Bf基因在仿刺参体腔液溶菌和溶血过程中的作用进行了初步的验证和分析；筛选了用于定量分析的内参基因以及克隆了补体凝集素途径相关的C型凝集素基因MBL，并进行了进化分析和表达规律研究；对补体C3、Bf和H基因的多态位点与抗病相关性进行了初步的分析。项目执行过程中共发表论文9篇，其中SCI收录6篇；获得国家发明专利授权1项。