钙抑制口腔癌变的机制

口腔癌鳞状上皮细胞癌是一种常见的恶性肿瘤，起源于粘膜内的角朊细胞，具有转移快和死亡率高的特点，因此，深入研究口腔癌的发病机制以寻找新的干预靶点，对该疾病的预防与治疗至关重要。我们的初步研究资料表明，补钙可提高小鼠口腔粘膜组织内的钙离子浓度，补钙的小鼠在致癌物诱导后，口腔粘膜肿瘤的发病率较低,提示钙能抑制口腔癌变的发生,但机制尚不清楚，我们多年的研究证明，钙诱导角朊细胞的分化是通过激活p120-连接素信息通路而完成的，本项目将通过观察p120-连接素组织特异性敲除小鼠的口腔粘膜对致癌物的敏感性，来确定p120-连接素是否介导钙抑制口腔癌变的作用，并通过观察口腔粘膜角朊细胞内的p120信息通路与原癌基因蛋白表皮生长因子受体（EGFR）信息通路之间的相互作用，深入探讨钙的抑癌机制，为防治口腔癌药物的开发提供重要的理论依据。

为了确定钙是否并如何抑制口腔鳞癌，我们观察了几种含钙量不同的饮食对化学诱导的小鼠口腔鳞状上皮肿瘤形成的影响，结果显示，高钙饮食可提高小鼠口腔粘膜组织内的钙离子浓度，摄入高钙饮食的小鼠在致癌物诱导后，口腔粘膜肿瘤的发病率较低，并且我们观察到补钙的小鼠口腔粘膜正常上皮的增生受到抑制而分化得到促进，我们还观察到摄入高钙饮食的小鼠口腔粘膜正常上皮内的E-钙粘素、β-连接素、p120连接素(p120)和EGFR表达增高水平升高和PLC-γ1表达水平降低。而摄入低钙饮食的小鼠出现相反的结果，这些结果提示钙能抑制口腔癌变的发生，并且能抑制口腔粘膜的增生以及促进口腔粘膜的分化。我们还比较了含钙和去钙的牡蛎粉对p120敲除小鼠口腔癌变的影响，我们发现，摄入含钙的牡蛎粉的小鼠口腔肿瘤发生率明显低于摄入去钙的牡蛎粉的小鼠，并且摄入含钙的牡蛎粉的小鼠与正常饮食组的小鼠比较，前者的口腔粘膜分化水平增高且增生水平降低。这些结果提示牡蛎中的钙能抑制口腔癌的发生，并且能抑制口腔粘膜上皮的增生和促进口腔粘膜上皮的分化。为了确定p120是否介导钙的抑制口腔鳞癌的作用，我们还观察了几种含钙量不同的饮食对p120敲除的小鼠口腔粘膜的增生、分化及癌变的影响，我们发现，敲除p120阻止了钙的抑癌作用，并且阻止了钙对口腔粘膜增生和分化的调节，说明p120介导钙抑制口腔鳞癌的作用，并且还介导钙抑制口腔粘膜的增生和促进口腔粘膜的分化的作用。 为了进一步确定p120下游的信息通路，我们从细胞及分子层面上观察了p120下调的口腔鳞癌细胞（Tca8113）内的PLC-γ1的定位与信号传递， 我们发现，p120下调后，细胞膜中的E-钙粘素和β-连接素的水平下降，细胞膜中的PLC-γ1的水平下降，而细胞核内PLC-γ1的水平升高。并且p120下调后，EGF诱导的PLC-γ1核内聚集水平更进一步上升，肿瘤细胞增殖水平显著提高。而同时下调PLC-γ1后，EGF的这种作用消失，提示钙通过p120使PLC-γ1封存在细胞膜上，钙通过这种作用机制来抑制口腔鳞癌细胞的增殖。并且我们还进一步观察了EGF受体信号通路下游的信息传递机制，我们发现，EGF促使PLC-γ1进入细胞核后与PIKE结合，然后激活PI3K和PKC-ξ及核仁素，最终促使细胞增生，而钙能抑制这条信号通路，从而抑制细胞增生。