SOX10调控神经嵴干细胞衍生的黑色素细胞分化与发育的作用机理研究

SOX10作为一种重要转录因子在神经嵴干细胞衍生的黑色素细胞分化与发育中起着作用，但其调控机理未明。根据国内外在这一领域的研究现状，我们假设SOX10可通过调控某些下游未知的、复杂的基因和信号途径网络，在黑色素细胞的分化与发育中扮演着极其关键的作用。本项目拟在前期工作的基础上，采用Sox10基因敲除小鼠，运用基因表达谱分析法，从解析SOX10在胚胎黑色素细胞分化与发育中调控的下游靶基因的角度着手，对其下游复杂的基因和信号途径网络进行分析，继而利用PCR和RNA原位杂交技术，对筛选差异表达的候选下游靶基因检测，最后通过RNA干扰和外源性基因过表达，对SOX10相关下游调节基因在黑色素细胞分化与发育中的功能进行深层次的分析。通过这一原创性研究，可望较为完整地阐明SOX10在黑色素细胞分化与发育中的调控机理，从而为揭示干细胞发育的多潜能性及复杂的分化调控机制提供崭新的视角和新思路。

SOX10是神经嵴干细胞衍生分化的黑色素细胞发育所必需的。本课题采用了Sox10基因敲除小鼠小鼠作为疾病模型和神经嵴干细胞衍生分化的黑色素细胞作为首选实验系统，利用了Sox10基因敲除小鼠胚胎、转基因小鼠和胚胎组织ex in vivo培养方法，对Sox10在黑色素细胞前体发育分化与增殖过程中的功能进行了研究；并运用了原代胚胎神经管外植培养和细胞特异性基因转导技术，对Mitf在黑色素细胞分化中的作用进行了分析；然后运用了基因表达谱分析法，对黑色素细胞增殖与分化过程中Mitf的下游靶基因进行了解析；继而通过了RNA干扰和基因过表达技术，对SOX10相关下游调节基因在黑色素细胞分化与增殖中的功能进行了分析。这一原创性研究成果将较为完整地阐明SOX10在神经嵴干细胞衍生分化的黑色素细胞分化与增殖中的调节机理起到积极的作用。