Cdh1（FZR1)磷酸化新位点被调控的机理、对功能的影响、及其意义。

APC/C连接酶在细胞周期中起重要作用，它必须被Cdh1(FZR1)或Cdc20活化, 但Cdh1本身的活化机制尚待解决, Cdh1及其底物（Plk1和Skp2）高表达与肿瘤相关，作为头颈肿瘤预后指标，但其机制不明。我们的研究表明：Cdh1有两个新的被GSK-3β和Cdks磷酸化位点（Ser-36和Ser-40），肿瘤组织芯片结果提示，该磷酸化可能正向调节Cdh1活性。本项目拟证实Cdh1在体内外是GSK-3β和Cdks的底物，从分子水平阐明Cdh1被GSK-3β和Cdks磷酸化后的功能改变及机理、调控机制及意义，并检测鼻咽癌中GSK-3β是否失活、及Cdh1、Plk1、Skp2等是否高表达，且探讨GSK-3β、Cdh1、Plk1、Skp2等是否与鼻咽癌的发病、治疗监测及预后相关。本项目的完成对Cdh1活化机制、细胞胞周期调控均有重要价值，也可能为鼻咽癌的发病机制、个体疗法提供新的思路。

细胞周期调控的关键分子，主要由三个泛素-蛋白酶体系（SCF，APC/C和Cul4－DDB1）所调控。其中，APC/C E3连接酶有两个活化分子Cdc20和Cdh1。本项目主要研究对象是Cdh1：我们发现了两个Cdh1（FZR1)磷酸化新位点：即ser36和ser40。它们在体内、体外可以被GSK-3B和Cdks磷酸化，这两个位点的磷酸化状态不影响其E3连接酶活性，但可能影响其稳定性。在细胞周期中，Cdh1的ser36和ser40磷酸化可能促进G1/S转换（论文正在整理中）。.由于本项目的资助，我们对APC/C E3连接酶的活性调控、底物鉴定等也进行了大量研究，并取得了一定成绩：1）DNA损伤密切相关的蛋白DDB1可以结合Cdh1, 并影响APC/CCdh1（E3连接酶）的活性，从而调控细胞分裂（通讯作者, J. Biol. Chem., 2010）。2）骨肉瘤中，抑癌基因BRD7在细胞分裂期被APC/C E3连接酶降解，而且APC/C E3-BRD7通路对骨肉瘤细胞的增殖、化疗敏感性等有重要意义（通讯作者, Oncotarget，2014, under review）..同时，在本项目的研究过程中，我们发现Chk1、GSK-3B、hSSB1等在肿瘤的发生、发展、治疗和预后等方面的作用和意义。.1）Chk1在肝癌中是癌基因，其高表达是肝癌不良预后的指标，其机制是降解肝癌中抑癌基因SYK(L)，在肝癌样本中Chk1与SYK(L)呈显著的负相关性（通讯作者，J. Clin. Invest.，2012）。.2）GSK-3B在骨肉瘤中起癌基因作用，其机理是通过NF-kB通路，GSK-3B/NF-kB通路可作为骨肉瘤病人的预后指标和治疗靶点。单独或同时抑制GSK-3B、NF-kB，可以增强骨肉瘤细胞对化疗的敏感性（通讯作者，J. Natl. Cancer Inst.，2012）。该论文发表的同期，James R. Woodgett对此进行了肯定性的专题评述。.3）揭示了hSSB1调控细胞周期和DNA损伤检测点的分子机制：hSSB1作为伴侣分子，以p53非依赖型方式调控p21蛋白的稳定性（通讯作者，Oncogene, 2011）。同时，调控p53蛋白稳定性，并通过调节p300介导的p53乙酰化，从而调控p53转录活性（通讯作者，Cell Res.，2013）。