食管鳞癌细胞与相关淋巴管内皮细胞相互对增殖、迁徙影响及机制研究

Recent studies have showed tumor lymphatic endothelial cells (TLEC)play an important role in tumor metastasis. There are a little reports in interaction between its cells and tumor cells,and study of blocking up.There is no study in interaction between TLEC and esophageal cancer cells(ECc),and study of blocking up.This study as follows:After the isolation，culture and identification of TLEC from esophageal squamous cell carcinoma tissues,to probe the useful of TLEC for proliferation or invasive of different differentiationin ECc in vitro,to analyse the influence of TLEC for growth and lymphangiogenesis in nude mice model for human esophageal carcinoma.To observe the influence of diffenert differentiation ECc for the proliferation and lymphangiogenesis of TLEC. This study may provide experimental evidences for exploring the mechanism of lymph-wessel metastasis and the antilymphangiogenesis treatment of esophaeal carcinoma.

研究表明，肿瘤相关微淋巴管内皮细胞在肿瘤淋巴道转移中起重要作用，其与肿瘤细胞间的相互作用及通过阻断其相互作用进而减少淋巴道转移的研究少见报道，有关食管癌细胞与其相关淋巴管内皮细胞相互对增殖、迁徙等影响及机制尚未见报道。本课题拟在分离、培养及鉴定食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞的基础上，探讨食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞体外对不同分化程度的食管鳞癌细胞增殖及侵袭力的影响及其机制；构建裸鼠食管癌移植瘤模型，体内观察食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞对移植瘤生长情况及淋巴管生成的影响；观察食管鳞癌细胞培养上清液对其相关微淋巴管内皮细胞增殖情况及体外成管能力的影响；探讨抑制食管癌相关微淋巴管内皮细胞体外成管能力及增殖的方法。为进一步探讨食管癌淋巴道转移机制及其阻断研究提供理论依据。

背景：淋巴道转移是食管癌最常见的转移途径，较多患者确诊时已发生淋巴道转移。随着淋巴管内皮特异标记物和淋巴管生长因子的发现，抑制肿瘤淋巴管新生为控制肿瘤淋巴道转移提供新的靶点，因此，探讨食管癌淋巴管生成及淋巴管生成相关的微淋巴管内皮细胞生物学特性具有重要意义。研究内容：收集新鲜食管鳞癌组织标本，运用免疫磁珠法体外分离食管癌相关微淋巴管内皮细胞，对其培养和鉴定；分别收集食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞和正常人幼儿真皮来源的微淋巴管内皮细胞作为条件培养基，研究体外对不同分化程度的食管鳞癌细胞增殖和侵袭力的影响，以及对体内移植瘤生长情况和淋巴管生成的影响；同时研究不同分化程度的食管癌细胞系细胞对食管癌微淋巴管内皮细胞增殖及体外成环的影响；使用VEGF-C siRNA和endostatin分别处理不同分化程度的EC9706细胞和KYSE150细胞，作为条件培养基，观察对食管癌相关淋巴管内皮细胞成管能力和增殖的影响。重要结果：成功分离、培养及鉴定食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞；食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞可促进食管鳞癌细胞的增殖和侵袭能力，对不同分化程度的食管鳞癌细胞影响不同，对低分化食管鳞癌细胞影响更明显；食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞可以促进裸鼠食管癌移植瘤的生长和淋巴管生成；不同分化程度的食管癌细胞均可促进食管鳞癌相关微淋巴管内皮细胞增殖和体外成环，低分化食管癌细胞效果更加明显；VEGF-C siRNA真核表达载体和endostatin均可抑制食管癌相关微淋巴管内皮细胞成管和增殖能力，机制可能与抑制VEGF-C的表达有关。科学意义：选取我国最常见恶性肿瘤食管癌为研究对象，选取恶性肿瘤最常见的转移途径为切入点进行研究。探讨了不同分化程度的鳞癌细胞与食管鳞癌相关淋巴管内皮细胞间的相互影响，以及阻断淋巴管生成的新方法，为临床阻断食管癌等恶性肿瘤的淋巴道转移奠定理论基础。