白花丹醌干预肝癌血管新生及其信号调控研究

The study found that plumbagin had significant anti-hepatoma effect, however, the mechanism of its anti-hepatoma is still unclear. Affecting tumor development factors is complex and diverse, aggregation, migration, activation of vascular endothelial cells leads to tumor angiogenesis causing tumor metastasis and recurrence of the tumor refractory, and there are varieties of growth factors such as extracellular matrix components and proteolytic enzymes involved in this process. In order to understand whether Plumbagin affects the formation of tumor angiogenesis. The project targeting tumor vascular endothelial cells and hepatoma animal models is to observe the effect of plumbagin on tumor vascular endothelial cells migration-related factors such as of Ang-Ⅱ, VEGF and CTGF by methods of immunofluorescence, western blot analysis and quantitative PCR, et al. The above research is to understand plumbagin on hepatocellular carcinoma angiogenesis sectors and their target sites. Futher study the effect of Plumbagin on hepatoma vascular endothelial cell receptor tyrosine kinase phosphorylation and signal transduction pathways signaling molecule P13, AKT, pAKT expression levels in order to elucidate the molecular mechanism of Plumbagin intervention hepatoma newborn for the development of Plumbagin anti-hepatoma to provide a more scientific basis, its development and utilization will promote economic and social development in Guangxi.

研究发现白花丹醌具有明显的抗肝癌作用，然而，其抗肝癌的作用机制仍不清楚。影响肿瘤的发生发展因素复杂多样，血管内皮细胞的聚集、迁移、活化导致肿瘤新生血管的形成而出现肿瘤转移、复发是肿瘤难治的主要原因，而在此过程中则有多种细胞因子、胞外基质成分，蛋白水解酶等参与。为明确白花丹醌是否对肿瘤新生血管的形成产生影响，本项目拟以肿瘤血管内皮细胞和肝癌移植瘤动物模型为研究对象，通过免疫荧光、western blot、定量PCR等方法，观察白花丹醌对肿瘤血管内皮细胞迁移活化影响，明确白花丹醌干预肝癌血管新生的作用环节及其靶位点，并从白花丹醌对肿瘤血管内皮细胞受体酪氨酸激酶磷酸化及其信号转导途径相关信号分子P13、AKT、pAKT表达水平阐明白花丹醌干预肝癌血管新生的分子机制，为开发白花丹醌抗肝癌提供更多的科学依据。广西是"白花丹"的主要产地，资源丰富，它的开发利用将促进广西经济和社会的发展。

肿瘤的发生和发展是非常复杂的过程，除了外源性致癌因素的作用，机体的内部因素也发挥着重要的作用。这些因素包括宿主影响肿瘤和肿瘤影响宿主。其中血管内皮细胞的聚集、迁移、活化导致肿瘤新生血管的形成而出现肿瘤转移、复发的主要原因，而在此过程中则有多种细胞因子、胞外基质成分，蛋白水解酶等参与。白花丹醌抗肝癌机制是否与抗肿瘤血管生成有关，本项目以肿瘤血管内皮细胞和肝癌移植瘤动物模型为研究对象，综合应用分子生物学、病理学、生物化学等现代科学技术论证白花丹醌对肝癌肿瘤血管新生的影响，体外实验证实肝癌细胞释放到肿瘤微环境中的某些因子可以促进血管内皮细胞的增殖，肝癌SMMC-7721、Hep3B cells细胞的条件培养基可以促进内皮细胞系EA.HY926细胞生成管腔状结构，说明这些由肝癌细胞释放到肿瘤微环境中的因子还可以促进血管内皮细胞生成新生血管，而白花丹醌抑制PI3K-Akt，VEGF/VEGFR和Angiopoietins/Tie2通路以及血管生成因子(VEGF,CTGF,ET-1 bFGF)，从而影响肿瘤血管内皮增殖、细胞骨架、迁移侵袭、分泌活性物质，从而影响肿瘤血管生成。同样在裸鼠肝癌移植瘤模型中亦发现白花丹醌抑制肿瘤的生长和肿瘤血管的生成。综上所述,研究结果表明,白花丹醌在肝细胞癌中具有抗血管生成作用。本课题从肝癌肿瘤血管内皮结构或功能的新视角阐明白花丹醌抗血管新生的分子机制，为白花丹醌防治肝癌提供更全面的实验依据，为开发和利用广西特色中药成分白花丹醌的抗肝癌作用提供较充分的实验和理论依据，达到了研究的预期目标。