本研究将PCR扩增的HTV76-118RNA小片段的cDNA克隆插入到载体PDS56/RBSⅡ-(O)-6His中。通过IPTG诱导表达以及镍螯合层析而提纯重组NP,经过SDS-PAGE、免疫转印和ELISA方法分析其抗原性,证实该重组NP与毒粒NP相同,均为50KD,能与HFRS患者血清产生特异性反应。以此重组NP作为Ag制备抗NPMcAb,获得两株持续稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株。用抗NP McAb建立μ-capture-ELISA方法。证实该研究中所纯化重组NP作为Ag,避免了组织培养病毒的感染性和非特异性以及难以标准化的缺点。所建立的μ-capture-ELISA,检测HFRS病人血清中IgM Ab的方法具有特异性、敏感性、可靠性,可作为早期诊断HFRS的试剂。
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数据更新时间:2023-05-31
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