兔出血症病毒翻译起始与调控机制研究

Rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) is a member of calicivirus.Its genome is a positive-sense, single-stranded RNA molecule, which .has two short untranslated regions（UTR）in both ends of RHDV genome.There are two open reading frames (ORFs) in the middle of RHDV genome. Though the function of some proteins has been identified,the mechanism of translation initiation and expression regulation of RHDV protein is still not clear. The results of our primary research showed that the translation of RHDV genome is cap-independent,and there isn't internal ribosomes binding sites (IRES) in RHDV genome. We hypothesis that the RNA sequences at the 5' end of RHDV genome may direct translation initiation of RHDV protein. We now aim to characterize the role of these sequences in viral protein synthesis using reporter gene constructs as well as the reverse genetics system. The results of the project will be helpful for further exploration the mechanism of molecular pathogenesis of RHDV and development of a new vaccine.

兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV）是杯状病毒科的重要成员，其基因组是一种单股正链RNA分子。基因组首尾末端分别有一段短的非编码区(UTR)，中间含有两个开放阅读框架（ORF1，ORF2）。虽然，RHDV基因组编码的部分蛋白和功能已得到鉴定，但是病毒的蛋白翻译起始与调控机制仍然不清楚。我们前期研究证明RHDV蛋白翻译起始不依赖于帽子结构，其基因组末端序列也不含有类似内部核糖体结合位点（IRES）元件，推测RHDV可能采用了一种新颖的蛋白翻译起始与调控机制。鉴于此，本项目拟利用反向学遗传技术，结合体外翻译和蛋白互作等技术开展相关研究，以期阐明RHDV的翻译起始方式、翻译调控机制以及参与翻译调控的顺式作用元件和细胞因子等。该研究具有鲜明创新性，其研究结果将为进一步研究RHDV分子致病机理和研制新型疫苗等提供重要理论依据。

兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV）是杯状病毒科的重要成员，其基因组是一种单股正链RNA分子。基因组首尾末端分别有一段短的非编码区(UTR)，中间含有两个开放阅读框架（ORF1，ORF2）。虽然，RHDV基因组编码的部分蛋白和功能已得到鉴定，但是病毒的蛋白翻译起始与调控机制仍然不清楚。我们前期研究证明RHDV蛋白翻译起始不依赖于帽子结构，其基因组末端序列也不含有类似内部核糖体结合位点（IRES）元件，推测RHDV可能采用了一种新颖的蛋白翻译起始与调控机制。鉴于此，本项目利用反向学遗传技术，结合体外翻译和蛋白互作等技术开展了RHDV翻译相关病毒蛋白的鉴定、RHDV蛋白表达与翻译起始因子之间的关系以及RHDV基因组末端序列对病毒蛋白表达与调控的影响等研究。研究结果证明, RHDV的衣壳蛋白、次级结构蛋白以及非结构蛋白（VPg和NSP1）等蛋白都参与了病毒的翻译过程，其中VPg蛋白在RHDV基因组翻译起始阶段充当帽子类似物的功能。细胞因子eIF4E在RHDV翻译过程中发挥重要作用，它作为桥梁一方面与VPg互作结合在病毒基因组5’末端，另一方面它又招募其它细胞翻译起始因子组成翻译起始复合物启动病毒的翻译过程。此外，我们还证实RHDV基因组的非编码区也参与调控病毒的翻译和复制过程。总之，该项目研究结果为进一步研究RHDV分子致病机理和研制新型疫苗等提供了重要理论依据。