HCV核心抗原在肝细胞脂肪代谢中的作用及机制研究

丙型肝炎是世界范围内的重要血源性传染病。目前研究认为HCV在肝内复制可直接导致肝细胞脂肪变性，且与HCV核心抗原有关。研究发现HCV核心抗原是一种脂滴相关蛋白，不同亚型HCV核心蛋白虽然具有很高的同源性，但生物学行为存在显著差异。HCV3a型感染者脂肪肝发生发生率为75%，而其它类型只有50%，HCV3型所导致的脂肪肝更严重，并且HCV3型对抗病毒治疗的反应明显高于其它病毒亚型。我们克隆了HCV1b和3a型核心抗原基因，研究发现两种核心抗原均定位于脂滴表面并导致肝细胞脂肪变性，且HCV3a较1b能明显增加肝细胞脂肪含量，但具体机制尚不清楚。本课题拟通过生理学、分子生物学等多种方法，通过分析HCV核心抗原不同亚型功能及作用机制上的异同，系统全面地研究HCV核心抗原在肝细胞脂肪代谢过程中的作用及作用机制，为HCV感染的对症治疗提供依据。

丙型肝炎是世界范围重要血源传染病，HCV感染可导致肝脂肪变性，HCV核心抗原是脂滴表面相关蛋白，与肝脂肪变性有关。HCV分为6个基因型，各型地理分布、临床过程不尽相同。1b分布广泛，3a更易导致肝细胞脂肪变性。HCV核心抗原导致肝脂肪变性及不同核心抗原（3a和1b）导致肝脂肪变性差异的分子机制如何？本课题从细胞及分子水平对这一问题进行研究，取得以下成果：.1)构建稳定表达HCV核心蛋白的人肝Huh-7细胞系，发现HCV核心蛋白3a和1b可导致肝细胞脂肪变性（3a＞1b）及肝细胞凋亡（1b＞3a），并且二者之间存在差异。.2)基因芯片确定HCV 3a和1b的基因表达谱及差异表达基因。基因功能分类表明差异表达基因在脂肪代谢（ABCA1、ABCC1、ABCG1、FABP、HMGCR、APOC1、ACSL4、PHCA、OSPBL10）、转录与翻译（SIRT1、CREB1、RXRA、TIEG2、PHF15、ANC2H01、EIF2C2）及细胞生长分化（EGFR、KHDRBS1）过程中发挥作用。.3)microRNA芯片确定HCV 3a和1b的microRNA表达谱及差异表达microRNA。5个microRNA上调（miR-16-2*, miR-423-3p, miR-30a*, miR-663 and miR-92b），11个microRNA 下调（miR-224, miR-629*, miR-542-3p, miR-132, miR-455-5p, hsa-miR-192*, miR-34b*, miR-95, miR-885-5p and miR-664）。预测差异表达microRNA靶基因及其功能和通路，确定这些microRNA在脂肪代谢和转运中发挥作用。.4)分析差异表达microRNA靶基因（miR224-ACSL4、miR224-HMGCR、miR885-5p-ABCA1、miR34b-ABCC1、miR132-FABP2、miR30a*-CREBBP、miR664-RXRA、miR132-SIRT1），发现HCV核心蛋白可能通过microRNA-靶基因网络促进肝细胞脂肪变性。.5)此外，发现白藜芦醇可以通过上调Sirt-1及PPAR-α表达抑制HCV核心抗原导致的肝细胞脂肪变性。