槲皮素调控乙酰肝素酶对宫颈癌转移和血管生成影响的研究

槲皮素广泛分布于多种药用植物，属黄酮类化合物，具有多种生物活性，尤其是良好的抗肿瘤活性。乙酰肝素酶（HPA）是体内降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的特异性内切酶，HPA在宫颈癌细胞中高表达。我们前期的研究表明槲皮素促进宫颈癌细胞凋亡、抑制增殖及侵袭转移，预实验表明槲皮素抑制宫颈癌细胞中HPA高表达。因此我们认为槲皮素抑制宫颈癌转移和血管生成与HPA相关。为证实这一假说，本课题组拟采用体外血管生成三维培养模型及裸鼠移植瘤模型，运用transwell小室、基因沉默、real-time PCR、western-blot等技术检测槲皮素对宫颈癌组织和细胞中HPA表达的影响，以及槲皮素抑制HPA表达后宫颈癌细胞侵袭和血管生成能力的改变，探讨槲皮素抑制宫颈癌发生、发展的作用机制，为临床应用槲皮素预防、治疗宫颈癌提供理论依据和实验参考。

槲皮素广泛分布于多种药用植物，属黄酮类化合物，具有多种生物活性，尤其是良好的抗肿瘤活性。槲皮素能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡、调节细胞周期、减少血管侵犯等发挥抗肿瘤作用已被一系列实验研究所证实。但由于槲皮素生物活性广泛，其抗肿瘤作用机制尚不清楚，其在临床其它肿瘤的应用仍受到限制。乙酰肝素酶（HPA）是体内降解细胞外基质主要成分硫酸乙酰肝素蛋白多糖的特异性内切酶，HPA在宫颈癌细胞中高表达。本课题组前期的研究表明槲皮素促进宫颈癌细胞凋亡、抑制增殖及侵袭转移，预实验表明槲皮素抑制宫颈癌细胞中HPA高表达。因此我们认为槲皮素抑制宫颈癌转移和血管生成与HPA相关。为证实这一假说，本课题组利用免疫荧光检测HPA在各种宫颈癌细胞株中的表达，并检测槲皮素对Caski细胞、HeLa细胞HPA表达水平的影响，应用Transwell小室基质划痕损伤，观察槲皮素对宫颈癌细胞侵袭能力的影响。结果表明，HPA在两种宫颈癌细胞（HeLa,Caski）均中有显著表达。随着槲皮素浓度升高，HPA表达降低，随着时间增加，槲皮素对HPA的表达抑制效果增强。宫颈癌细胞在槲皮素作用下侵袭能力下降，将HPA基因沉默后槲皮素对宫颈癌细胞侵袭能力无明显改变。槲皮素在基因及蛋白水平上均能有效抑制HPA的表达，从而抑制宫颈癌细胞的生长，并可能通过调节乙酰肝素酶（HPA）活性来抑制宫颈癌侵袭，为槲皮素抑制宫颈癌发生发展的作用机制及在体内抑制宫颈癌细胞生长提供了理论依据，也为临床应用槲皮素预防、治疗宫颈癌提供理论依据和实验参考。