癌/睾丸抗原SPATA20在胆管癌发生、发展过程中的功能及机制研究

Cholangiocarcinoma is the second most common primary hepatic malignancy with a poor prognosis, and the pathogenesis of cholangiocarcinoma is still unclear. In our previous study, a proteomics approach was used to identify potential biomarkers of cholangiocarcinoma in human bile and revealed SPATA20 as a novel biomarker for cholangiocarcinoma diagnosis. SPATA20 specifically expressed in testis in rat, which suggest that SPATA20 may play an important role in the carcinogenesis of cholangiocarcinoma as a cancer/testis antigen. The proliferation of cholangiocarcinoma cells was inhibited when SPTATA20 was knock-down by RNAi. The present project is aimed to reveal the function and mechanism of SPATA20 involved in the carcinogenesis and development of cholangriocarcinoma from the following studies: 1) To determine the role of SPATA20 involved in the carcinogenesis and development of cholangiocarcinoma in vitro and in vivo. 2) To determine the regulation to wnt /β-catenin signaling pathway via interaction with CSNK1D. 3) Identify differential proteins when SPATA20 was down-regulated by proteomics strategies and analysis the pathways related by bioinformatics.

胆管细胞癌是肝脏第二常见恶性肿瘤，预后差，发病机制不明。我们在前期研究中，采用蛋白质组学方法从人胆汁筛选到胆管癌标志物SPATA20，并证实对胆管癌有诊断价值。SPATA20属于癌/睾丸抗原，提示其参与肿瘤发生、发展。我们前期研究也发现下调SPATA20能显著抑制胆管癌细胞的生长和增殖能力。生物信息学分析提示SPATA20可能通过CSNK1D调控wnt/β-catenin通路，参与胆管癌的发生、发展。本项目将就以下内容展开深入研究：1)借助RNAi的方法，在细胞、裸鼠、人群样本多层次探讨SPATA20在胆管癌发生、发展中的作用；2)验证SPATA20与CSNK1D的相互作用及对wnt/β-catenin通路的调控作用；3)利用蛋白质组学方法筛查SPATA20下调后发生变化的蛋白，生物信息学分析其参与的生物学过程及信号通路，旨在阐明SPATA20在胆管癌发生、发展中的作用及可能分子机制。

胆管细胞癌是肝脏第二常见恶性肿瘤，预后差，发病机制不明。我们在前期研究中，采用蛋白质组学方法从人胆汁筛选到胆管癌标志物SPATA20，并证实对胆管癌有诊断价值。SPATA20 属于癌/睾丸抗原，提示其参与肿瘤发生、发展。本项目在细胞、裸鼠、人群样本多层次探讨SPATA20 在胆管癌发生、发展中的作用及可能分子机制。寻找肝癌侵袭转移新的治疗靶点，改善肝癌患者预后具有重要理论意义和实用价值。本课题目前已基本完成全部实验内容，主要研究结果如下：.1.胆管癌中SPATA20表达水平高于正常胆管组织，且与病理分级正相关，说明SPATA20是一个癌基因；.2.在胆管癌细胞中下调SPATA20后，胆管癌细胞的生长、增殖能力受到显著抑制；.3.进一步的，胆管癌细胞中SPATA20下调后，其侵袭转移能力受到显著抑制；.4.体内实验证实下调SPATA20表达可抑制移植瘤成瘤能力及生长速度；.5.SPATA20下调后，β-catenin通路失活，下游经典靶基因CyclinD1，c-myc，ZEB1， Snail下调，抑制胆管癌细胞的EMT过程，导致胆管癌细胞侵袭转移能力下降。.6.通过蛋白质组学手段，筛选得到系列受SPATA20调控的下游靶基因，为后续深入研究分子机制及胆管癌治疗、预后评估提供大量的潜在靶标和标志物。.本研究初步阐明了SPATA20通激活启动下游靶基因转录，诱导胆管癌细胞发生EMT，促进其增殖、侵袭、转移，为今后利用其在胆管癌治疗以及预后评估中提供新的研究思路。