急性肺损伤中腺苷A2A受体与miR-214相互表达调控的促炎作用与机制研究

过度炎症反应是急性肺损伤（ALI）的本质,腺苷A2A受体（A2AR）活化在ALI中具有抑炎保护作用，但其自身表达调控对该抑炎作用的影响尚不清楚。基于前期研究发现ALI患者及小鼠外周血白细胞上A2AR蛋白水平降低与miR-214上调密切相关，结合生物信息学分析及文献，我们推测：ALI中，A2AR与miR-214通过相互表达调控形成miR-214上调而A2AR表达降低的恶性循环，从而扩大炎症反应，加重肺损伤。因此，本研究拟用荧光素酶报告基因检测、EMSA、ChIP实验、细胞炎症模型、小鼠ALI模型、选择性敲除/低表达或重建/过表达外周血白细胞A2AR/miR-214及关键信号通路检测等证实ALI中A2AR与miR-214相互表达调控的促炎作用与机理，为ALI的发生发展机制提出新的观点和证据，为合理应用A2AR与miR-214调节剂发挥抑炎保护作用、治疗ALI的新策略提供实验依据及理论支持。

基于前期研究发现临床急性肺损伤患者外周血白细胞中A2AR mRNA水平变化不大而蛋白水平表达显著降低，且其表达降低与miR-214表达上调密切相关的临床现象，本项目旨在探索急性肺损伤等炎症条件下A2AR与miR-214相互表达调节的作用及机制。通过三年的研究，我们借助小鼠巨噬细胞、小鼠急性肺损伤模型等：1、证实了A2AR与miR-214形成负反馈调环路，参与对急性肺损伤过度炎症反应进程的调控；2、明确了其相互表达调控的机制为：miR-214通过与A2AR基因3’UTR上特异序列的结合而抑制A2AR蛋白水平表达；A2AR活化后通过PKA-NF-κB途径抑制NF-κB激活从而下调miR-214的表达；3、在小鼠急性肺损伤模型中，联合应用miR-214拮抗剂及A2AR激动剂对减轻肺部炎症损伤的效果优于单独使用上述两种制剂。上述研究结果率先发现了A2AR-miR214之间的负反馈调节环路并阐明了其调控机理，为急性肺损伤等炎症相关疾病的认识与治疗提供了新的视角及实验证据。