NF-κB信号通路在神经母细胞瘤浸润、转移中的作用机制及干预研究

Neuroblastoma ( NB ) is the most common malignant tumor in children, a high degree of malignancy, early metastasis, is the main cause of death in children with NB, known as the" king of children with cancer". Studies have shown that NB occurrence, development and inflammation related to a number of inflammatory cells in the microenvironment of the tumor cells can help tumor cell proliferation, invasion and metastasis. We established early in human NB cell lines and nude mice transplantation tumor and metastatic tumor model, to explore the neuroblastoma tumorigenesis, development transfer mechanism research to prepare the basis; and found neuroblastoma cells of chemotactic factor CXCL12 demonstrated the concentration dependence of the directional migration and invasion. This paper is focused on the NF kappa B pathway" inflammatory carcinoma chain" key regulatory link basis, and further by in vitro and in vivo NB NF kappa B signal expression, and the use of the NF kappa B targeting small interference blocking NF kappa B signaling pathway, on the in vitro and in vivo anti proliferation and invasion, search for tumor treatment and drug treatment target, and to have both antagonistic uncontrolled inflammatory response and antineoplastic novel targeted antitumor therapy and drug therapy clinical transition to lay the foundation.

神经母细胞瘤（NB）是小儿最常见的恶性肿瘤，恶性程度高，早期即发生转移，是NB患儿的主要死因，被称为儿童"癌症之王"。有研究表明，NB的侵袭、转移与炎症，特别是与非可控性炎症具有相关性,我们前期研究亦发现NB的侵袭、转移与一些炎症细胞、炎症介质及炎症因子有着潜在的联系，即发现了MMP-2, MMP-9高表达可促进NB的浸润转移，NB细胞对趋化因子CXCL12表现出浓度依赖性的定向迁移和侵袭；我们推测NB的侵袭、转移与肿瘤微环境中的炎症环境存在某种联系，因此本课题正是着眼于NF-κB信号通路的"炎癌链"关键调控环节，进一步通过体内外实验观察 NF-κB信号通路在NB中表达情况，并利用靶向性小干扰RNA技术阻断NF-κB信号通路，探讨其体内外抗增殖及侵润作用，寻找肿瘤治疗新途径及抗肿瘤药物治疗的新靶点，为阐明NB的分子发病机制及其临床治疗夯实理论基础。

神经母细胞瘤（Neuroblastoma，NB）是小儿最常见的恶性实体肿瘤之一，其恶性程度高，早期即发生转移，被称为难治多变的“儿童癌症之王”。除常见的肺、骨、脑转移外，60%的患儿发生骨髓转移，是患儿死亡的主要原因。尽管目前对NB患儿采取手术切除、化疗、放疗、免疫治疗和骨髓移植等综合治疗，其生存率也仅有40%。NB发病、增殖和转移机制复杂，目前尚未完全阐明。探明NB增殖和转移的分子机制，改进NB的治疗策略，对挽救更多NB患儿的生命具有重要意义。在国家自然科学基金的资助下，我们进行了NF-κB 信号通路在NB增殖、浸润和转移中的作用机制及干预研究，证实NF-κB 通路通过调节其下游蛋白CXCR4 的表达来增强NB 细胞的侵袭能力，通过抑制NF-κB 通路来降低NB细胞的侵袭转移能力。靶向siRNA阻断NF-κB 信号通路对NB侵袭转移的影响研究，证明慢病毒介导的siRNA 通过下调NF-κB 下游基因CXCR4、VEGF 的表达抑制NB的侵袭转移。我们在进行NF-κB 信号通路研究的过程中，发现miRNA在NF-κB 信号通路及NB增殖、浸润和转移中发挥着重要作用。miR-338、miR-142-3p等miRNA在NB转移瘤及原发瘤中表达具有明显差异。通过研究发现miR338 能够通过下调NB细胞CXCR4 mRNA 及蛋白的表达参与调节NB的侵袭与转移。miR-142-3p 的靶基因为HMGB1，miR-142-3p 能够通过靶向调控HMGB1的表达而增加NB细胞对CDDP 化疗的敏感性。此外，我们还发现Prokineticin-1影响了NB增殖、转移和侵袭。HOXC9蛋白与NB的发展和预后相关。综上，课题研究证实了NF-κB 信号通路、miRNA和Prokineticin-1等在NB增殖、浸润和转移中发挥了重要作用，并进行干预的研究。代表性论文发表在《FEBS Journal》、《FEBS Letter》、《中华小儿外科杂志》和《中华实验外科杂志》等杂志。本课题成果鉴定，整体水平达到国际领先水平。将研究成果在学术会议上进行学术交流。培养泰山学者1名，培养博士、硕士研究生10名。研究成果将可能挽救更多神经母细胞瘤患儿的生命，具有显著的社会效益。