骨桥蛋白及其单克隆抗体调控青光眼手术后瘢痕形成的研究

滤过道的瘢痕形成是导致青光眼手术失败的主要原因。一系列复杂的动态生物学反应参与瘢痕形成过程，包括成纤维细胞的增殖、新生血管的形成等。骨桥蛋白可以诱导成纤维细胞增殖、新生血管形成，是调控组织修复和疤痕形成的重要因子。基于我们的前期研究基础①明确骨桥蛋白诱导新生血管形成的作用及机制，②发现青光眼手术后骨桥蛋白表达明显升高，我们提出骨桥蛋白通过激活PI3K/Akt和ERK1/2信号转导通路，诱导青光眼手术后滤过泡组织内的成纤维细胞增殖以及新生血管形成，调控瘢痕形成的过程。我们拟先在体外观察骨桥蛋白对人Tenon囊成纤维细胞增殖的影响，然后建立小梁切除手术动物模型，评价骨桥蛋白在青光眼手术后瘢痕形成中的作用及其机制，并探讨骨桥蛋白单克隆抗体1A12抑制人Tenon囊成纤维细胞增殖及青光眼手术后瘢痕形成的作用。通过上述研究，探讨青光眼手术后疤痕形成的机制，并为抑制青光眼手术后疤痕形成提供新的思路。

滤过道的瘢痕形成是导致青光眼手术失败的主要原因。一系列复杂的动态生物学反应参与瘢痕形成过程，包括成纤维细胞的增殖、新生血管的形成等。骨桥蛋白可以诱导成纤维细胞增殖、新生血管形成，是调控组织修复和疤痕形成的重要因子。基于我们的前期研究基础①明确骨桥蛋白诱导新生血管形成的作用及机制，②发现青光眼手术后骨桥蛋白表达明显升高，我们提出骨桥蛋白通过激活PI3K/Akt和ERK1/2信号转导通路，诱导青光眼手术后滤过泡组织内的成纤维细胞增殖以及新生血管形成，调控瘢痕形成的过程。研究课题首先通过体外分离并原代培养人Tenon 囊成纤维细胞，以骨桥蛋白诱导，应用萤火素酶报告基因测定、Western blot、免疫荧光法检测、荧光定量RT-PCR等技术检测骨桥蛋白诱导人Tenon 囊成纤维细胞活化的作用及其信号通路，并以相关蛋白分子的抗体进行阻断。然后，建立小梁切除手术动物模型，评价骨桥蛋白单克隆抗体1A12调控青光眼手术后瘢痕形成的作用。研究证实：（1）骨桥蛋白与αvβ3整合素配体结合，通过激活PI3K/pAkt/NFκB信号通路而非ERK1/2信号通路，诱导人Tenon 囊成纤维细胞活化，参与青光眼手术后瘢痕形成过程；（2）骨桥蛋白单克隆抗体1A12通过阻断骨桥蛋白介导的PI3K/Akt信号转导通路，抑制人Tenon囊成纤维细胞的活化，发挥抑制青光眼滤过手术瘢痕化的作用。 因此，通过激活PI3K/pAkt/NFκB信号通路，OPN是参与青光眼滤过手术瘢痕化的关键细胞因子，OPN单克隆抗体1A12有望作为调控青光眼手术后瘢痕形成的新举措。