骨桥蛋白在TAO眼外肌纤维化中的作用

甲状腺相关性眼病（thyroid-associated ophthalmopathy,TAO）眼外肌纤维化是导致患者出现复视、斜视、眼球位置固定、压迫性视神经病变致失明难以逆转的最主要的病理损伤之一。骨桥蛋白可以诱导成纤维细胞增殖和迁移，是调控组织纤维化形成的重要因子。基于我们的前期研究明确①T 淋巴细胞介导的TAO 眼外肌来源的CD90+成纤维细胞的活化对TAO 眼外肌纤维化具有重要意义，②骨桥蛋白通过激活PI3K/Akt 和ERK1/2信号转导通路诱导细胞活化，③OPN可以诱导眼眶成纤维细胞活化。我们拟于在眼外肌来源的CD90+成纤维细胞和TAO 动物模型上，观察骨桥蛋白对CD90+成纤维细胞增殖、表型转变、细胞外基质合成、MMPs/TIMPs 系统表达的影响及PI3K/Akt 和ERK1/2传导信号的蛋白表达变化及其磷酸化情况，明确骨桥蛋白在TAO 眼外肌纤维化中的作用及其机制。

甲状腺相关性眼病（thyroid-associated ophthalmopathy, TAO）眼外肌纤维化是导致患者出现复视、斜视、眼球位置固定、压迫性视神经病变致失明难以逆转的最主要的病理损伤之一。骨桥蛋白可以诱导成纤维细胞增殖和迁移，是调控组织纤维化形成的重要因子。T淋巴细胞介导的眼外肌来源的CD90+成纤维细胞的活化对TAO眼外肌纤维化具有重要意义，前期的研究证实骨桥蛋白通过激活PI3K/Akt和ERK1/2信号转导通路诱导细胞活化，而且骨桥蛋白可以诱导眼眶成纤维细胞活化。我们推测骨桥蛋白通过PI3K/Akt或/和ERK1/2信号通路激活眼外肌来源的CD90+成纤维细胞，参与TAO眼外肌纤维化过程。研究课题通过体外分离并原代培养眼外肌来源的CD90+成纤维细胞，以骨桥蛋白诱导，应用电泳迁移率变动分析、、Western blot、免疫荧光法检测、荧光定量RT-PCR等技术检测骨桥蛋白诱导眼外肌来源的CD90+成纤维细胞活化的作用及其信号通路，并以相关蛋白分子的抗体进行阻断。研究证实：（1）骨桥蛋白与αvβ3整合素配体结合，通过激活PI3K/pAkt/NFκB信号通路而非ERK1/2信号通路，诱导眼外肌来源的CD90+成纤维细胞活化，参与TAO患者眼外肌纤维化过程；（2）骨桥蛋白单克隆抗体、整合素αvβ3抗体可以完全阻断骨桥蛋白的生物学作用。 因此，通过激活PI3K/pAkt/NFκB信号通路，OPN是参与TAO 眼外肌纤维化的关键细胞因子，有望作为临床甲状腺相关性眼病眼外肌纤维化防治的新靶点。