TNF-α介导NF-κB信号通路活化在骨性关节炎形成中的作用及蠲痹汤防治的机制研究

Osteoarthritis is common joint disease in clinical, its symptom include chronic pain, instability, stiffness and narrow space of joint. OA usually affect hand, knee, hip and spine. OA patient always lost work ability and life quality, there is no effective drugs for OA at present. Lymphatic vessel and lymphatic drainage system play an important role in the Reumatoid Arthritis pathological process, but its function is not well studied in the pathology process of osteoarthritis. .This project is an extension of the National Natural Science Fund for international cooperation. We will perform research on surgery induced osteoarthritis mouse model. Under the assistance of lymphatic imaging system, cellular biology, molecular biology method, we will study the cellular mechanism of lymphatic drainage system function in osteoarthritis model, and the molecular mechanism of the regulation effect of JuanBi formula on the apoptosis of lymphatic smooth muscle cell and lymphatic endothelial cell to promote lymphatic drainage and improve osteoarthritis, through TNF-α and NF-κB signal pathway. We will start a new area to study the treatment of osteoarthritis.

骨性关节炎是临床常见的关节疾病，主要临床表现包括慢性疼痛，关节不稳定，僵直以及关节间隙狭窄。骨性关节炎经常累及手部，膝部，髋部及脊柱的关节，影响患者的工作能力和生活质量，目前仍然缺乏有效的治疗药物。淋巴管及淋巴回流系统在类风湿关节炎发病过程至关重要，近年来受到广泛关注，但是其在骨性关节炎发病过程中的作用至今仍不清楚。.本研究项目是在项目组承担的国家自然科学基金国际重大合作项目研究基础上的深化。用手术诱导骨性关节炎模型，采用体内成像技术、细胞生物学、分子生物学等研究方法，研究骨性关节炎和淋巴回流系统的细胞学机制以及蠲痹汤抑制TNF-α和NF-κB 信号转导通路调节淋巴管平滑肌细胞,内皮细胞凋亡，促进淋巴回流系统功能，改善骨性关节炎的分子机制，为骨性关节炎的治疗开启新的研究领域。

背景：骨性关节炎是临床常见的关节病，前期研究发现淋巴系统参与其发病。.目的：研究炎症因子介导NF-κB信号通路调控关节淋巴回流功能与骨性关节炎发病机理、病理变化的相关性及蠲痹汤延缓骨性关节炎病理进程的机制研究。.内容： 建立小鼠膝关节淋巴回流功能的检测平台；建立小动物超声检测小鼠膝关节滑液量的技术平台；我们利用磁珠分选出KOA组与假手术组关节腔中的淋巴管内皮细胞，抽提RNA，再通过RNAseq技术分析，发现有1000个基因具有表达差异，差异基因所属的10余条信号通路均与NF-κB信号通路相关，炎症诱导淋巴管内皮细胞产生大量的一氧化氮合酶(iNOS)，抑制淋巴管平滑肌细胞功能基因表达，从而引起关节淋巴回流功能降低；我们利用磷酸二酯酶抑制剂体外干预炎症诱导的淋巴管内皮细胞发现其可以明显抑制淋巴管内皮细胞iNOS蛋白表达，在体内实验中，磷酸二酯酶抑制剂可以促进KOA膝关节淋巴回流功能，延缓KOA膝关节病理退变进程，硼替佐米可以抑制M1型巨噬细胞诱导的淋巴管内皮细胞炎症，促进淋巴回流功能延缓KOA膝关节病理退变进程；利用蠲痹汤灌胃KOA小鼠观察其对膝骨关节炎退变进程的影响，灌胃PBS作为阴性对照组，灌胃莫比可作为阳性对照组，结果发现蠲痹汤对于KOA早期病理退变有延缓的作用。.科学意义：建立检测关节淋巴回流功能的方法学平台；发现炎症因子NF-κB信号通路降低关节淋巴回流功能，加快骨性关节炎病理进程，而且M1型巨噬细胞参与诱导淋巴管内皮细胞炎症的过程；发现蠲痹汤在手术诱导小鼠膝骨关节炎模型早期具有促进淋巴回流功能，延缓KOA病理进程的作用。