MiR-182诱导乳腺癌早期转移的分子机制

MicroRNA芯片结果显示miR-182在乳腺癌组织中高表达，并其表达水平与乳腺癌恶性程度成正比。进一步研究发现miR-182在转移性乳腺癌细胞中高表达，而且在非转移性乳腺癌细胞中过表达miR-182可下调NFκB抑制蛋白TNIP1的表达，并提高NFκB转录活性、上调Snail及诱导上皮细胞间质转化(EMT),但机制尚待阐明。本项目将以高表达或抑制miR-182的细胞为模型，通过染色体免疫共沉淀、蛋白免疫共沉淀及荧光素酶报告基因分析等方法,研究miR-182诱导EMT的分子机制,探讨miR-182下调TNIP1，增强NFκB转录活性及上调Snail的信号通路，并通过在体肿瘤动物模型确定miR-182诱发EMT、增强肿瘤细胞转移和浸润的功能，为过表达miR-182通过直接抑制TNIP1，激活NFκB信号通路上调Snail,进而诱导EMT的假设提供证据,并为治疗恶性肿瘤提供新的分子靶点。

肿瘤的远处转移作为恶性肿瘤的重要生物学特征，是引起肿瘤恶化和复发的根本原因。但肿瘤转移的发病机制到目前为止仍不清楚。大量研究表明miRNAs能够调控细胞增殖、抗凋亡、血管增生、侵袭转移等肿瘤发生发展的生物学过程，可作为肿瘤治疗的潜在靶点。本项目研究主要集中在miRNAs在肿瘤转移中的生物学功能及其分子机制。在研究中我们发现：(1) TGFβ信号通路通过作用于miR-182的启动子激活miR-182的转录，并且miR-182抑制NF-κB信号通路多种负性调控因子的表达，从而诱导NF-κB信号通路的持续性激活进而促进肿瘤的发生发展(J Clin Invest. 2012;122(10):3563-78; IF: 12.812)。(2) miR-374a通过同时下调WNT/β-catenin信号通路的多个靶蛋白(WIF1, WNT5A, PTEN)，持续性激活WNT/β-catenin信号通路从而促进乳腺癌细胞发生上皮间质化和远处转移(J Clin Invest. 2013;123(2):566–579; IF:12.812)。(3) miR-30e*通过下调NF-κB信号通路负性调控因子IκBα的表达，激活NF-κB信号通路从而促进胶质瘤的侵袭和血管新生(J Clin Invest. 2012;122(1):33-47; IF: 12.812)。(4) miR-186在肺腺癌中低表达，且miR-186的表达越低，患者的生存预差。miR-186可通过抑制细胞周期中的重要调控因子Cyclin D1 (CCND1)、cyclin-dependent kinase (CDK)2和CDK6的表达，抑制细胞周期，从而抑制肺腺癌细胞的增殖(Cancer Res. 2013; 73(2):756-766; IF:8.65)。（5）miR-204启动子的甲基化导致miR-204在胶质瘤中低表达；在胶质瘤细胞中回补miR-204的表达抑制肿瘤细胞的干细胞样特性和侵袭能力(Cancer Res. 2013;73(2):990-999; IF:8.65)。以上的研究表明，miRNAs在肿瘤转移过程中起到了重要的作用，可作为肿瘤预后判断的潜在标志物和治疗靶点。