低能量光疗（LLLT）减轻烧伤创面早期进行性加深的作用及机制研究

Early burn wounds progression is a common clinical problem in deep partial burn wounds and there is no effective control methods for it. Excessive local inflammatory response and ischemia reperfusion injury are important reasons for burn wounds deepening, and how to protect the stasis zone is the key to prevent burn wounds deepening. Low-level light therapy (LLLT) can significantly improve cellular hypoxia and promote capacity of anti-inflammatory and antioxidant by activating photoreceptors of mitochondrial to prevent apoptosis and necrosis. Preliminary experiments have demonstrated that low energy 640nmLED therapy can relieve the necrosis of stasis zone and down-regulate the TNF-a, IL-1, IL-6 expression. Thus，our study is intended to research the therapeutic effect of low-energy 640nm LED red light therapy for stasis zone through the rat burn comb model and in vitro epidermis and fibroblasts hypoxia and burn serum stimulation model. We will deeply research the possible molecular mechanisms of LLLT regulating mitochondrial cytochrome oxidase activity, improving inflammatory response and enhancing tolerance of cell hypoxia and resistance to apoptosis by using immunohistochemistry, ELISA, real-time PCR and flow cytometry method. We believe this study will provide new treatment ideas and methods for the prevention of burns early deepening.

深II度烧伤创面早期进行性加深是临床上常见的继发性损伤，目前尚无有效的防治措施。局部过度炎症反应、缺血再灌注损伤导致瘀滞区细胞凋亡是创面加深的重要因素，保护瘀滞区细胞是防止创面加深的关键。低能量光疗（LLLT）通过激活细胞线粒体光感受器发挥生物学效应，可显著提高细胞耐缺氧和抗炎抗氧化能力，抑制细胞凋亡、坏死。前期实验提示640nmLLLT减轻烧伤后瘀滞区的坏死和下调瘀滞区TNF-a，IL-1，IL-6的表达。因此，本研究拟应用大鼠梳齿状烫伤模型研究LLLT对烧伤瘀滞区的保护作用，并结合表皮、内皮和成纤维细胞体外缺氧及烧伤血清刺激模型，通过图像分析、免疫组化、ELISA、Real-time PCR、流式细胞术等方法，从体内和体外探讨低能量红光光疗通过调节线粒体细胞色素氧化酶活性，改善炎症反应、增强细胞耐缺氧、抑制细胞凋亡的分子机制。为防止烧伤创面早期进行性加深提供新的治疗思路和方法。

深II度烧伤创面早期进行性加深是临床上常见的继发性损伤，目前尚无有效的防治措施。局部过度炎症反应、缺血再灌注损伤导致瘀滞区细胞凋亡是创面加深的重要因素，保护瘀滞区细胞是防止创面加深的关键。低能量光疗（LLLT）通过激活细胞线粒体光感受器发挥生物学效应，可显著提高细胞耐缺氧和抗炎抗氧化能力，抑制细胞凋亡、坏死。因此，本研究应用大鼠梳齿状烫伤模型研究LLLT对烧伤瘀滞区的保护作用，并结合表皮、内皮和成纤维细胞体外缺氧及烧伤血清刺激模型，通过图像分析、免疫组化、ELISA、Real-time PCR、流式细胞术等方法，从体内和体外探讨低能量红光光疗通过调节线粒体细胞色素氧化酶活性，改善炎症反应、增强细胞耐缺氧、抑制细胞凋亡的分子机制。为防止烧伤创面早期进行性加深提供新的治疗思路和方法..1、.成功建立成熟的烧伤淤滞区模型制作流程，可重复性强，示范性好。该模具（用于动物的烧烫伤实验装置）已经获得国家发明专利授权201610791887.X。为烧伤早期瘀滞区的研究提供良好的病例模型。形成的论文《大鼠皮肤烫伤瘀滞区模型的建立和改良》已在2016 年全国烧伤年会上交流。.2、.明确640nmLED红光全身照射对休克期大鼠血管通透性的改善和炎症反应的调节。《全身低能量光疗对重度烧伤大鼠早期全身炎症反应的影响》，《第二军医大学学报》，第38卷，第8期，987-992页，2017。.3、.明确640nmLED红光可通过光化学作用，进而减少照射部位细胞凋亡等。同时研究探索确定其最佳的光剂量6J/cm2和光参数组合，为20mv/cm2*300s。.4、 明确640nmLED红光通过抑制烧伤瘀滞区细胞凋亡、坏死以及减少为血栓形成，减少甚至避免烧伤创面早期加深现象，为烧伤创面早期治疗提供了新的思路。.该项目是一个跨学科联合的项目，将目前较热门的光疗技术和光生物学效应用于烧伤创面早期进行性加深的防治研究。给烧伤早期创面渐进性加深这个棘手的问题带来了无创、安全、方便、有效、价格低廉的可能手段。并且围绕该课题，发表文章2篇，1篇已在投稿中，1篇正在撰写中。一项国家发明专利（201610791887.X）和一项实用新型（201621024988.6）