针刺督脉穴对AD模型大鼠神经细胞自噬改变的影响及分子机制研究

Alzheimer's disease (AD) has become the fourth leading cause of human death because of its high disability rate and mortality and has placed heavy burdens on patients and members of their families.As the pathological mechanism of AD has not been completely clarified, there is almost no ideal therapy according to modern medicine. The study on the prevention and treatment methods of this disease has been an urgent problem for TCM. According to clinical study,acupuncturing "baihui "（GV 20）and "dazhui"（GV 14）to treat AD has got an ideal result,but the associated mechanisms have not yet been elucidated. Nerve cells autophagy has become a focus of AD research in recent years and it has been proved that autophagic-lysosomes played an important role in pathogenesis and interventions with medications of AD.This study focused on the latest progress in research of AD,it will study the effect of electroacupuncturing "baihui "（GV 20）and "dazhui"（GV 14）to change the nerve cells autophagy in AD model rats'brain tissues and their molecular biology mechanism.We will explore the relationship between autophagy and apoptosis,try to elucidate the intrinsic mechanism of acupuncture on AD from a new point of view, so as to provide scientific basis and reference for clinical therapy of AD.

老年性痴呆（AD）致残率高、死亡率高，已成为人类第四大死亡原因，给患者和家庭造成了沉重的负担，由于发病机制尚未完全阐明，本病目前尚缺乏理想的现代医学治疗方法。AD的防治研究已成为中医学迫切需要解决的热点问题。临床研究发现，针刺督脉百会、大椎穴治疗AD取得了理想的效果，但相关的机制仍未阐明。神经细胞自噬近年来在AD研究领域备受关注，已经证明自噬溶酶体途径在AD发病机制及药物干预过程中起重要作用。本研究聚焦AD研究领域最新进展，研究电针百会、大椎穴对AD模型大鼠脑组织神经细胞自噬功能的改变及其调控的分子生物学机制，探讨细胞自噬与凋亡的关系，试图从全新的角度阐明针刺治疗AD的内在机制，为临床治疗AD提供借鉴和科学依据。

阿尔茨海默病(AD)是一种发生于中老年的原发性脑退行性变性疾病，随着人口老龄化的加剧，该病的发病率逐年升高，遗憾的是，该病目前尚缺乏理想的治疗方法。我们通过多年临床观察发现针刺督脉穴可以改善患者学习记忆能力，提高患者生活水平，本研究旨在建立阿尔茨海默病动物模型，观察针刺督脉穴对AD模型大鼠学习记忆能力的改善作用，探讨针刺督脉穴对AD模型大鼠的疗效机制，从细胞自噬角度阐释针刺治疗AD的内在机理，为AD防治提供新的治疗思路及实验依据。.方法：通过外源性双侧海马区注射Aβ25-35方法建立AD模型，采用电针督脉穴法对AD模型大鼠进行干预，同时设西药对照组，通过Morris水迷宫实验观察干预前后大鼠学习记忆能力，采用HE和免疫组化法观察大鼠脑组织形态学、海马区Aβ、LC3B、Beclin1表达情况，采用RT-PCR技术观察大鼠海马区mTOR mRNA、总Tau mRNA含量表达情况，采用流式细胞术定量检测脑组织细胞凋亡情况。.结果：治疗后电针组大鼠东向、南向和北向逃避潜伏期较西药组缩短，差异均有统计学意义（P<0.05）, 电针组跨台次数较西药组增加，差异有统计学意义（P<0.05）；海马区Aβ表达量降低，LC3B和Beclin1表达量升高，大鼠海马区mTOR mRNA、总Tau mRNA表达降低，与模型组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；西药组和电针组大鼠脑组织细胞存活率(LL)均升高，神经细胞死亡率（UL) 、神经细胞凋亡率(LR) 、凋亡和死亡中间形态细胞百分率(UR)均降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。.结论：电针督脉穴可以改善AD大鼠学习记忆能力，减少大鼠大脑海马区Aβ沉积，降低大鼠海马总Tau蛋白含量，上调自噬诱导相关蛋白LC3B和Beclin1表达水平，下调mTOR信号通路，同时提高大鼠脑组织细胞存活率(LL)，降低神经细胞凋亡率(LR)，推测电针督脉穴治疗AD的作用机制可能与诱导自噬、减轻大鼠海马区Aβ沉积和抑制凋亡有关。上述结果对进一步研究针刺治疗AD的取效机制具有重要意义，同时为临床防治AD提供了更加有效的靶点。