RSK4在肾细胞癌中的表达及其功能的分子机制研究

肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一，约占泌尿系统恶性肿瘤的3％。目前对于RCC缺乏早期的特异性诊断方法，导致大部分患者发病时已出现转移，因此迫切需要研究敏感、特异的早期诊断及预后评估的因子。RSK4是核糖体s6蛋白激酶 (ribosomal s6 kinase，RSK)基因家族成员之一，由746个氨基酸组成，广泛表达于人体的脑及肾组织，在细胞的增殖、分化及存活中起着重要作用。最初研究发现RSK4功能的缺失可导致X染色体连锁智力障碍；另有研究报道RSK4作为肿瘤抑制基因，可以抑制乳腺癌的侵袭及转移，并且在结肠癌及肺癌中表达下降。RSK4在肾细胞癌中的研究尚未见报道，但是我们前期实验发现，RSK4阳性的乳头状肾细胞癌的恶性度高，预后差。本项目将利用病理学、分子生物学及统计学的方法来探讨RSK4作为肾细胞癌的诊断及预后因子的可能性。

本项目为期三年，现已按研究计划顺利完成实验目标，实验结果已撰写成文，发表2篇英文SCI论著（其中1篇影响因子>5）及1篇中文核心期刊。先讲本项目简要总结如下：.【目的】.1.研究RSK4在人体正常组织和常见恶性肿瘤组织的表达，为深入研究其功能提供研究基础；.2.研究RSK4在RCC的表达，分析其与患者临床病理特征以及预后的关系；.3.初步探讨RSK4在RCC细胞系中的表达及其功能的分子机制。.【主要研究内容及方法】.1.应用免疫组织化学EnVision法研究RSK4在101例RCC手术标本中的表达情况；.2.应用统计学分析RSK4的表达与RCC患者临床病理特征的关系及与患者预后的关系，并绘制生存曲线；.3.过表达或低表达RSK4，并应用流式细胞术检测其对细胞周期的影响；同时采用Transwell技术检测RCC细胞侵袭迁移能力的变化。.【主要研究结果及关键数据】.1.RSK4在RCC中的表达高于正常肾组织(P=0.003)，且其在不同类型的肾细胞癌中表达不一(P=0.021)，尤其在两种不同类型的乳头状肾细胞癌中表达差异明显(P=0.001)。RSK4的阳性表达与肿瘤的高Fuhrman分级（P<0.001）、高病理分期（P<0.001）及出现淋巴结转移（P<0.001）和远处转移（P=0.039）显著正相关；但与患者的年龄、性别、肿瘤大小及无明显相关性（P>0.05）；单因素及多因素生存分析显示，RSK4阳性表达与RCC患者不良预后显著相关；.2.流式细胞学分析表明过表达RSK4可以促进RCC细胞的细胞周期进展，且这种调节周期的作用与周期相关蛋白p53、pRb相关；.3.Transwell实验表明过表达RSK4可以促进肾癌细胞的侵袭迁移能力，其功能可能与CD44及MMP-9作用相关；.4.应用ERK及RSK4的特异性抑制ERK或RSK4表达后，肿瘤的侵袭迁移能力下降。.【结论】.1.首次发现RSK4的表达在不同RCC病理类型中强弱不等，提示其有助于不同类型RCC尤其是1型和2型乳头状癌的鉴别诊断；.2.RSK4可以成为RCC的一个潜在的独立预后因子；.3.RSK4可以促进RCC细胞系的细胞周期进展及侵袭迁移能力，提示其可能为RCC恶性进展及转移的关键分子之一，并有望作为一个新的潜在的治疗靶点。