S100A12-RAGE途经在川崎病冠状动脉病变中的作用及机制研究

现研究发现S100A12-RAGE途经在炎症调节中起关键作用，我们前期研究发现川崎病(KD)急性期循环内皮细胞(CECs)、其表面S100A12和RAGE表达明显增加，应用丙球后S100A12和RAGE仍持续增加，在有冠状动脉病变(CALs)的患儿更为明显。因此我们假设KD时血管内皮细胞(VEC)受S100A12攻击，VEC功能受损并从血管壁脱落，导致CALs。为了证实这一假设，我们准备在三个层面进行研究：(1)减少S100A12的产生；(2)对抗S100A12的作用；(3)阻断S100A12与VEC上受体RAGE的结合。评价血中S100A12和CECs的数量、其表面S100A12的量和RAGE的表达、冠状动脉的病变情况，冠状动脉内皮细胞的形态和结构，冠状动脉内皮细胞上S100A12的量和RAGE的表达，从而明确S100A12-RAGE途经在KD-CALs中的作用及机制。

一、研究川崎病病人血清中resistin, S100A12和sRAGE的关系，发现川崎病急性期血清中resistin和S100A12水平，包括resistin/sRAGE和S100A12/sRAGE水平显著增加，在热退后及亚急性期进行性下降。但sRAGE水平在川崎病急性期显著降低，在热退后及亚急性期进行性升高。在川崎病急性期、热退后及亚急性期，IVIG耐药病人的resistin水平明显高于IVIG敏感病人的水平。在川崎病急性期和亚急性期，IVIG耐药病人的S100A12水平明显高于IVIG敏感病人的水平。在川崎病热退后及亚急性期，IVIG耐药病人的sRAGE水平明显低于IVIG敏感病人的水平。Resistin水平与S100A12水平呈正相关，sRAGE水平与S100A12和resistin水平呈负相关。.二、研究RAGE和S100A12在川崎病血管内皮损伤中的作用，发现CRP显著增加血管内皮细胞的水平，在CRP浓度为25μg/ml时，血管内皮细胞水平增加2倍。但S100A12并不增加血管内皮细胞水平。SiRNA 可降低血管内皮细胞中RAGE mRNA的表达，用siRNA阻断血管内皮细胞中RAGE的表达可减少CRP诱导的血管内皮细胞水平的增加。RAGE参与了CRP诱导的血管内皮细胞的增加。这一作用可通过沉默RAGE的表达而减轻。RAGE在川崎病血管内皮功能损伤中起到非常重要的作用。.三、S100A12-RAGE途径在马血清诱导的冠状动脉炎中扮演重要角色，S100A12-RAGE之间存在着正反馈和负反馈的动态平衡。乌司他丁的干预并不能阻止马血清诱导的冠状动脉炎的进展，也不能阻断RAGE在内皮细胞的表达，但可以改变RAGE在心肌、平滑肌等组织的表达水平，轻度改变循环内皮细胞上RAGE阳性比例及S100A12在血清中的表达水平。.四、低浓度的人重组S100A12蛋白（小于1μg/ml）并不能诱导冠脉内皮细胞的显著损伤。大于5μg/ml的人重组S100A12蛋白可能引起人冠脉内皮细胞损伤，2.5μg/ml的浓度可能是S100A12诱导冠脉内皮损伤的临界条件。