印楝素对果蝇复眼发育的miRNA调控途径的干扰机制

miRNA是生命科学发展前沿和国际研究热点。miRNA几乎参与了昆虫生命过程每个重要环节，精确调控复眼等器官组织的发育。本项目在结题青年基金项目的基础上，以模式昆虫黑腹果蝇为试虫，生物信息学和实验生物学相结合，研究印楝素对黑腹果蝇复眼发育相关miRNA表达的影响；运用生物信息学鉴定、miRNA-mRNA复合物分析、基因定点突变方法相结合，确定主要相关miRNA的靶基因；运用miRNA特性异抑制方法，研究印楝素调控miRNA及靶基因表达与复眼发育的关联性；重点从Notch和EGFR途径角度研究印楝素处理对miRNA调控复眼发育的信号转导途径，基本阐明印楝素对果蝇复眼发育的miRNA调控途径的干扰机制。本项目不仅对于研究昆虫发育及其调控具有积极的科学理论意义，有利于丰富昆虫毒理学内容，而且对于寻找害虫防治新靶标，推动天然源农药创新发展和以miRNA为靶标的新型生物合理农药创制具有潜在的应用价值

miRNA 是生命科学发展前沿和国际研究热点。miRNA 几乎参与了昆虫生命过程每个重要环节，精确调控复眼等器官组织的发育。本项目在结题青年基金项目的基础上，以模式昆虫黑腹果蝇为试虫，1).建立了采用 RNA加尾和引物延伸 real time PCR法实时定量检测昆虫miRNA定量方法; 2).生物信息学和实验生物学相结合，研究印楝素对黑腹果蝇复眼发育相关 的34个miRNA 表达的影响，3).确定4个主要相关 miRNA 的4个靶基因；4).运用miRNA 特性异抑制方法，研究了印楝素调控3个miRNA 及靶基因表达与复眼发育的关联性；5).研究了印楝素处理对 miRNA 调控复眼发育的信号转导途径；6).明确了植物源杀虫成分骆驼蓬碱处理对bantam、mir-14和mir-2a的表达调控作用，探讨了印楝素等植物源杀虫成分化合物处理对相关 miRNA下游靶标的影响，基本阐明印楝素对果蝇复眼发育的 miRNA 调控途径的干扰机制; 7) 确定了茎环法鉴定非模式昆虫保守miRNAs的可用性，印楝素对黑腹果蝇复眼发育相关miRNA的表达调控规律在小菜蛾、斜纹夜蛾等非模式昆虫中获得印证。本项目结果对于研究昆虫发育及其调控具有积极的科学理论意义，有利于丰富昆虫毒理学内容，对于寻找害虫防治新靶标，推动天然源农药创新发展和以 miRNA 为靶标的新型生物合理农药创制具有潜在的应用价值。