白三烯B4-BLT1通路介导CD4+CD25+调节性T细胞募集到脂多糖诱发的急性肺损伤组织的研究

肺部严重感染是导致急性肺损伤的主要原因，目前急性肺损伤尚无特效治疗手段。最新研究发现急性肺损伤炎症局部聚集的CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）可能有助其症状的转归。然而，介导Treg募集到急性肺损伤炎症局部的相关趋化介质和受体不甚清楚。研究表明白三烯B4（LTB4）与其受体BLT1的作用通路介导部分T细胞亚群的迁移。本课题拟用LPS诱发的急性肺损伤小鼠模型和LTB4或BLT1特异性拮抗剂或BLT1基因敲除小鼠，评价LTB4-BLT1通路对Treg募集到炎症肺组织及对随后炎症缓解的影响，寻找并鉴定LTB4的主要细胞来源。我们期望通过该课题的实施，阐明介导Treg向炎症组织募集的关键趋化介质-受体通路及作用机制，为急性肺损伤的治疗提供理论基础，开辟新的途径。

近期研究表明，急性肺损伤小鼠支气管-肺泡灌洗液（BALF）中聚集的CD4+CD25+Foxp3+的调节性T细胞（Treg）发挥缓解气道炎症的作用，但是介导Treg细胞的气道招募的具体分子机制尚不明确。我们通过脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤小鼠模型，来确定白三烯B4（LTB4）的主要功能受体BLT1在Treg细胞气道迁移中所发挥的作用。我们检测了小鼠和人Treg细胞的BLT1表达水平，并分别通过体外和体内试验，评价了BLT1介导Treg细胞迁移的能力。我们发现活化Treg细胞的BLT1表达水平明显上调，体外趋化实验表明BLT1介导活化的，而不是静息的Treg细胞向LTB4的趋化。LPS诱导的急性肺损伤小鼠BALF的LTB4表达水平持续上升。LPS刺激后1天加入拮抗剂阻断LTB4-BLT1途径能显著的减少BALF中Treg细胞的数量，肺损伤的修复程度也明显受损，表现为BALF中持续上调的总蛋白水平，中性粒细胞浸润，以及多种促炎细胞因子表达水平。此外， LPS刺激接受过继转输野生型（WT）或BLT1-/- Treg细胞的Rag1-/-小鼠，相比转输正常的Treg细胞，转输BLT1-/-Treg细胞后，迁移到Rag1-/-小鼠BALF的Treg细胞数量明显减少，而且，Rag1-/-小鼠急性肺损伤炎症的缓解也明显延迟。这样，我们的发现揭示了在急性肺损伤缓解过程中，BLT1通过介导Treg细胞的气道招募来发挥抑制炎症的作用，提示在急性肺损伤发作后阻断LTB4-BLT1途径的治疗策略可能不利于急性肺损伤的缓解。