逍遥散抗抑郁疗效生物标志物分析及机理研究

阐明逍遥散抗抑郁治疗的机理和建立药效客观评价体系是该方剂现代研究的重要任务。本课题在前一国家基金项目基础上，拟以抑郁症病人为主要研究对象，采用代谢组学技术，寻找和明确与药效相关的疗效生物标志物，鉴定其化学结构；采用分析化学技术测定这些标志物群的含量，构建代谢物药效强度评价指标体系；采用生物信息学分析它们的生物学功能，探索逍遥散调节抑郁症的代谢途径，并分析与其它药理机制的相关性。研究结果将明确逍遥散抗抑郁治疗的整体药效及其作用强度，从调节代谢途径结合其它药理机制研究结果阐释逍遥散抗抑郁的作用机理，阐明多成分逍遥散复方区别于单一成分化学药的作用特点，明确标志物量化指标作为一种实验室检测手段辅助客观评价药物疗效的可能性，还为抑郁症发生提供代谢物水平证据。该研究思路注重标志物的定量表征，及代谢组学技术与其它技术手段的整合化，对探索中药复方作用机理、药效评价方法及筛选理想的抗抑郁药物，具有重要意义。

本项目对逍遥散抗抑郁疗效生物标志物及机理进行了研究。首先，依据诊断及排除标准，共纳入抑郁症患者62例，并完成观察病例58例，结果证明逍遥散对于轻中度抑郁症患者具有确切的治疗效果。其次，采用1H NMR、GC-MS和LC-MS三种技术手段，对抑郁症患者服用逍遥散前后以及健康对照组受试者的血浆和尿液进行了代谢组学分析。结果显示，血浆中共筛选出31种与逍遥散抗抑郁疗效相关的差异代谢产物，包括氨基酸类（丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸）、有机酸类（乳酸和草酸）、胺类（氧化三甲胺、谷氨酰胺以及神经酰胺）、脂肪酸（硬脂酸、十七碳二烯酸）、脂类（溶血性磷酸酰胆碱、鞘脂）、酰基肉碱类（肉碱C10:4和肉碱C14:2）以及其他（葡萄糖、胆碱）等；尿液中，共筛选出10种与逍遥散抗抑郁疗效相关的差异代谢产物，包括氨基酸类及其衍生物(酪氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、马尿酸)、有机酸类(柠檬酸、乳酸、黄尿酸、牛磺酸、α-酮戊二酸)以及胺类(二甲胺)。最后，根据受试者工作特征曲线分析（ROC, Receiver Operating Characteristic）结果表明，血液中乳酸、氧化三甲胺、苯丙氨酸、草酸和硬脂酸的ROC曲线下面积大于0.7，可作为逍遥散抗抑郁疗效生物标志物；根据动态分析结果，抑郁症患者服药二周后，尿液中乳酸、肌酐、二甲胺、苯丙氨酸、丙氨酸、酪氨酸、柠檬酸、马尿酸开始出现回调现象，服药8周后，处于正常水平，可作为逍遥散抗抑郁疗效生物标志物，这些生物标志物参与机体的神经递质合成、能量代谢以及肠道菌群活动等三大方面。.项目以代谢组学思路分析了中药复方逍遥散抗抑郁作用的疗效标志物，与分子药理学研究结果相比，具有整体性、客观性和系统性的特点，体现了复杂中药化学成分的多靶点、多通路、多途径的作用特点；从终端代谢物水平分析疾病发生的生物标志物及相关药物治疗的疗效标志物并阐释其作用机制，与基因组学、蛋白组学比较，更能够客观准确反映机体内已经发生了的事件，对于系统阐释疾病发生机理、发现并确认疾病发生的生物标志物及药物干预的疗效标志物，为建立快速、准确、简便的临床疾病诊断生物标志及临床疗效评价客观指标提供科学依据。