孕期母体胎盘及血叶酸受体抗体与胎儿神经管缺陷发生风险的相关性研究

Neural tube defects (NTD) are the leading cause of death of all infant deaths, although periconceptional folic acid supplementation can reduce the risk of NTD by as much as 70%. However, most pregnant women carrying an NTD-affected fetus do not have serum folate deficiency. The ability of placental folate transport in these women is unknown. Folate receptor can transport folate into cells. Autoantibodies to folate receptors (FR) have been observed in serum from women with a pregnancy complicated by an NTD. The function of autoantibodies to FR in human is unclear. A case-control study is designed to compare the levels of autoantibodies to FR in placenta/blood between NTD case mothers and control mothers, and to explore the association between autoantibodies to FR and the risk of NTD. The relationship between autoantibodies to folate receptors and folate levels in infants will also be analyzed by determining the levels of autoantibodies in placenta and folate in cord blood. The study will discover the impact of autoantibodies to FR on folate transport from mother to infant, determine the levels of autoantibodies to FR in pregnant women from some region of China, and identify the association between autoantibodies to FR and folate levels in infants, which is of great significance to elucidate the pathogenic mechanisms of birth defects and to develop effective strategies to prevent birth defects.

神经管缺陷(NTD)是围产儿死亡的主要原因之一，尽管围产期叶酸增补可降低70% NTD发生，但大多生有NTD患儿的妇女在孕期没有出现血清叶酸缺乏的临床症状，对于这部分患儿，其母亲叶酸的胎盘转运状态如何，目前缺乏研究。叶酸受体是介导叶酸进入细胞的重要转运体。人体存在叶酸受体自身抗体，可能与NTD发病有关，叶酸受体抗体在人体的作用机制不清。本课题拟采用病例对照研究方法，比较生育NTD患儿和生育健康儿妇女胎盘/血叶酸受体抗体的水平，探讨母体胎盘/血叶酸受体抗体与NTD风险之间的关系；通过测定胎盘内叶酸受体水平与脐带血内叶酸浓度，分析母体胎盘叶酸受体抗体与胎儿脐带血叶酸水平的相关性。本项目可以直接揭示叶酸受体抗体对于叶酸在母体向胎儿体内转运状态的影响，明确叶酸受体抗体中国部分地区人群存在状态及其与NTD关系，不仅对出生缺陷机制研究具有重要的科学意义，而且对降低围产儿死亡率起重要的公共卫生学意义。

背景：神经管缺陷(NTD)是围产儿死亡的主要原因之一，尽管围产期叶酸增补可降低70% NTD发生，但大多生有NTD患儿的妇女在孕期没有出现血清叶酸缺乏的临床症状。叶酸受体是介导叶酸进入细胞的重要转运体，人体存在叶酸受体自身抗体，叶酸受体自身抗体是否与NTD发病有关尚不清楚。.目的：分析生育NTD患儿和生育健康儿妇女血和胎盘叶酸受体抗体的水平，探讨母体血和胎盘叶酸受体抗体与NTD风险之间的关系。.方法：采用病例对照研究方法，从2011年到2013年在山西省募集118例神经管缺陷病例，232例对照，采集母体静脉血和胎盘。以纯化的人源叶酸受体蛋白为包被蛋白，以单克隆抗体为检测二抗，建立血浆叶酸受体自身抗体IgG/M的间接ELISA检测方法，评价其灵敏度、精密度及稳定性。运用建立的ELISA方法检测样本的抗体水平。.结果：从人胎盘中成功提取并纯化人源的叶酸受体蛋白，分子量为35–40 Kda，Western Blot方法显示此蛋白与叶酸受体抗体特异结合。ELISA方法标准曲线可检测的IgG/M浓度范围为6.25×10-4–8.00×10-2，最低检测限为3.13×10-4，批内差异为2.74%–8.07%，批间差异为4.16%–8.23%。同一样本不同稀释倍数下检测结果均在可接受范围内，结果较稳定。.母体孕期血浆叶酸受体自身抗体IgG和IgM水平与神经管缺陷及其亚型脊柱裂及脑膨出的发生风险均呈显著正相关，并存在剂量-反应关系。NTDs及其亚型脊柱裂及脑膨出病例组中，胎盘叶酸受体自身抗体的水平也与对照组有显著差异。病例组脐带血中叶酸受体自身抗体IgG与IgM的水平与对照组无统计学差异。.结论：成功建立检测人叶酸受体自身抗体IgG和IgM水平的方法。母体血和胎盘叶酸受体抗体与NTD的发生风险显著相关，且呈剂量反应关系。脐带血中叶酸受体自身抗体水平与NTD的发生风险无关联。.科学意义：成功建立的叶酸受体自身抗体检测方法灵敏，重复性好，可用于大样本量的人群检测。本项目直接明确了叶酸受体抗体在中国部分地区人群存在状态及其与NTD关系，对出生缺陷的机制研究提供了基础资料，具有重要的科学意义；为进一步出生缺陷的防治提供理论参考，具有重要的公共卫生学意义。