宫内营养不良胎鼠胰岛ε细胞分化及其调控机制

目前已证实宫内营养不良与成人期疾病如糖尿病、代谢综合征(MS)之间的相关性，但其病理生理机制尚待明确。ghrelin影响血糖、胰岛素水平，且与胰岛素抵抗密切相关。本研究组已发现宫内营养不良影响新生大鼠胰岛素分泌，导致胰岛ghrelin表达和ghrelin阳性细胞变化；且这种改变在生后持续存在。在前期工作基础上，本研究拟通过建立宫内营养不良模型，联用免疫荧光、激光共聚焦、原位杂交、细胞分选和表观遗传学技术等检测调控胰岛内分泌细胞分化的胚胎早、中、晚期转录因子Ptf1a、Ngn3、Pdx1、Pax4、Pax6、Nkx2.2在胰腺的表达和定位；明确宫内营养不良状态下上述转录因子对ε细胞分化的影响及其部分表观遗传学机制，进一步探索ε细胞与β细胞之间的相互作用。通过分离胰岛培养探讨宫内营养不良对胰岛分泌胰岛素和ghrelin功能的作用，从而探寻宫内营养不良对成人期糖尿病和 MS的程序化影响的机制。

1..课题组完成了构建发育过程中宫内营养不良胎鼠和宫内发育迟缓（intrauterine growth restriction IUGR）新生大鼠模型，并探究了宫内营养不良对ghrelin及胰岛素表达的影响。.2..课题组检测宫内营养不良大鼠胰岛特异性转录因子Pdx1和胰岛素表达，发现宫内营养不良组新生鼠和生后21天大鼠Pdx1和胰岛素均显著低于对照组，且Pdx1表达和胰岛素表达有相关性，提示宫内营养不良可能通过调控Pdx1水平影响胰岛素表达。.3..课题组探索了宫内营养不良状态下表观遗传学机制对ε细胞分化的影响。发现Pdx1、Ptf1a表达影响ε细胞分化；显示H3K4m3乙酰化修饰调控Pt1fa和PAX4基因的表达；蛋白乙酰化的改变参与了宫内生长迟缓大鼠胰腺的分化的过程，且这种过程可能通过调控胰腺发育相关的转录因子Pax4和Nkx2.2的表达来进行。.4..课题组比原定计划增加了高脂饮食对IUGR发育雌性大鼠CYP3A表达和活性的影响的研究。课题组发现，IGUR状态下CYP3A酶活性的差异主要表现在生后的早期，在7天及以后的几个发育阶段，与正常状态相比，IGUR大鼠体重始终低于正常出生体重大鼠，但两组之间酶活性未发现有显著差异。在本研究基础上，课题组进一步开展了高脂高能饮食下IUGR大鼠CYP3A表达的影响，并且发现了很有意义的研究结果。.5..课题组未能完成Ngn3及Pax6表达和定位的研究：由于模型大鼠标本发育早期的标本有限、而且课题组搜寻多家国内外试剂公司，反复试验发现Pax6等抗体不稳定，结果可靠待定。.6..在本课题的资助下，发表SCI论文3篇，综述3篇。另有1篇SCI综述已经接受；培养研究生2名；参加了国际会议并得到专业培训一次。