基于 EC-SMC-MC共培养体系的参莲提取物防治AS作用评价及机制研究

炎症反应在动脉粥样硬化（AS）形成、发展的各个阶段普遍存在。单核、内皮、平滑肌细胞之间的相互作用及触发的后继效应是AS炎症反应的核心环节之一。本研究针对AS形成及炎症反应过程中复杂的细胞间相互关系，以Millicell@ insert为载体，采用单核、内皮、平滑肌细胞共培养的方法，观察在AS危险因子刺激下三种细胞的相互作用及其功能的特征性改变，以此构建AS治疗药物药效研究的新的方法和评价体系，为从炎症角度干预AS的药物研究提供有效工具。同时以已经体内实验验证对AS形成及其炎症反应有肯定疗效的参莲提取物为例，以 Millicell@ insert EC-SMC-MC 共培养体系为工具，以炎症信号转导通路为切入点，从细胞、分子水平深入探讨参莲提取物对AS炎症反应的作用与机制。

炎症反应在动脉粥样硬化（AS）形成、发展的各个阶段普遍存在。内皮细胞（EC）、平滑肌细胞 (SMC) 、单核细胞 (MC)之间的相互作用及触发的后继效应是AS炎症反应的核心环节之一。本研究针对AS形成及炎症反应过程中复杂的细胞间相互关系，以Millicell@ insert为载体，采用EC-SMC-MC共培养的方法， 通过优化不同材质、接种细胞数、接种体积、培养时间、刺激因子等条件，从细胞形态、AS相关因子分泌情况、AS相关膜分子表达等多角度系统比较EC, SMC单独培养、EC-SMC共培养、EC-SMC-MC共培养、EC-SMC-MC共培养+ oxLDL等不同条件三种细胞在AS危险因子刺激下的相互作用及其功能的特征性改变，构建AS治疗药物药效研究新的方法和评价体系，为从炎症角度干预AS的药物研究提供有效工具。基于EC-SMC-MC共培养体系，证实参莲提取物可通过影响THP-1膜分子CD36表达、黏附、迁移、摄脂功能；影响HUVEC膜分子ICAM-1、细胞通透性、细胞骨架和胞浆游离钙；影响HUSMC细胞增殖及MMP9分泌等多个环节干预AS进程及炎症反应。证实参莲胶囊干预AS炎症的作用主要与NFκB通路有关，对PPAR通路作用不显著。参莲胶囊对NFκB通路的作用与ERK1/2、JNK、p38通路间存在交叉作用。