新的胃癌抑制基因GDDR与TFF1特异性结合在胃癌中的作用及机制

TFF1在胃癌中的作用存在争议，有研究表明TFF1可抑制胃癌细胞增殖，但也有其抑制凋亡、促进迁移而促进胃癌进展的报道，机制不清。GDDR是申请人率先发现并克隆的胃癌抑制基因，其抑癌机制尚未明确。有趣的是，我们发现GDDR能上调TFF1的表达，而GDDR与TFF1相互作用，有TFF1而无GDDR的胃癌预后更差。因此，TFF1的抑癌作用可能与GDDR直接相关，GDDR可能是决定TFF1不同生物学功能的"开关"。然而GDDR促TFF1表达的调控因素还不明确，GDDR和TFF1相互作用诱发的抑癌效应和相关信号通路有待进一步明确。本项目将通过标本数据库明确GDDR和TFF1的表达与临床资料的相关性；细胞学实验分析它们特异性结合在胃癌中的作用；筛选并验证GDDR上调TFF1的信号通路及它们相互作用后的下游信号分子；通过动物实验进行验证。该研究对进一步揭示胃癌的发病机制，提高胃癌的诊治水平具有重要意义。

本研究以GDDR与TFF1的异源二聚体结合关系为出发点，根据两者在功能和调控上的相关性，重点研究GDDR是否对TFF1的生物学功能具有决定性的作用。首先，我们通过对临床样本中GDDR和TFF1表达的检测和临床病例材料的分析，明确了GDDR和TFF1的表达关系及与胃癌的相关性；构建了GDDR Cys38位点突变载体(GDDRmut)，并建立SGC7901 GDDR、GDDRmut稳转细胞系,利用MTT、流式细胞检测和Transwell等对细胞的增殖、凋亡和侵袭能力进行检；利用基因芯片和高通量磷酸化通路检测，筛选相关调控通路，并结合Real-time PCR、Western blot和免疫荧光等技术对相关通路进行验证；并建立了动物模型进行验证。.通过上述研究，明确了GDDR与TFF1在胃癌中的表达特性，并对GDDR/TFF1异源二聚体在胃癌发生发展中的作用和相关机制进行了探讨，为进一步研究GDDR的生物学功能打下了良好的基础。