小菜蛾系统性RNA干扰关键基因的功能研究

RNA干扰（RNAi）技术已广泛应用于昆虫功能基因研究，其在害虫防治领域的应用是当前国内外研究热点，昆虫RNAi效应的传递机制是重要研究基础和迈向应用的关键环节。本项目在广东省产学研结合项目的基础上，在已获得小菜蛾系统性RNAi关键基因（SID）的前提下，深入研究重要农业害虫小菜蛾的系统性RNAi特性及功能。采用荧光定量PCR和免疫组化的方法，研究SID组织表达特征；通过RNAi技术及Sf-9真核细胞表达系统，揭示小菜蛾SID活体及离体的功能特性；构建小菜蛾T7噬菌体cDNA文库，筛选SID的互作蛋白。通过系统研究，深入探讨SID基因对吸收及传递外源siRNA的影响及机制，阐明小菜蛾系统性RNAi信号传导途径，丰富以siRNA或dsRNA为有效因子的生物农药的毒理学内容，为开辟害虫防治新领域，创制高效安全具有自主知识产权的"RNA干扰剂"提供理论基础。

系统性RNA干扰缺失（Systemic RNA interference defective, sid）蛋白在昆虫RNA干扰信号传递过程中发挥着重要作用。RNAi在害虫防治领域有着巨大的潜力，很有可能成为一种新的害虫防治手段，为防治重要农业害虫带来新思路。但昆虫的RNAi机制尚不清楚。本项目利用第二代测序技术，发现了RNAi机制的核心组成成分，并克隆了相关基因，对其的表达特征进行了研究，对其在RNAi过程中的功能进行了研究，对其作用机制进行了初步探索。在此基础上，本项目还探索了利用RNAi结合筛选的靶标基因防治害虫的田间和室内效果，为今后开发基于RNAi技术的新型生物农药提供基础。