N-糖基化修饰对日本乙型脑炎病毒生物学功能的影响

日本乙型脑炎病毒是一种重要的人畜共患传染病病原，外膜蛋白（PrM/M）、囊膜蛋白（E）和非结构蛋白1（NS1）是对该病毒生物学活性具有重要作用的三个蛋白，决定了病毒复制与成熟、细胞融合、组织嗜性、毒力、免疫保护力等重要属性。同时，日本乙型脑炎病毒的PrM、E、NS1蛋白均为糖蛋白，共包含4个N-糖基化位点，糖基化修饰对这三个蛋白功能的影响有待研究，对病毒生物学活性的作用有待阐明。本项目拟通过反向遗传操作，在DNA水平上对上述4个位点进行点突变以消除糖基化修饰，对拯救的病毒在感染性、毒力、免疫原性、组织嗜性以及蛋白细胞内定位和转运等方面与亲本毒株进行对比，研究消除糖基化修饰后日本乙型脑炎病毒上述生物学活性的变化，揭示N-糖基化修饰在日本乙型脑炎病毒中的生物学功能，为N-糖基化修饰功能机制的深入研究奠定基础，为该病毒分子致病与免疫机理研究、药物和疫苗分子设计提供思路。