护心方对动脉粥样硬化Th17/Treg平衡的调节效应及机制

Atherosclerosis (AS) is a lipid-driven chronic inflammatory disease of the arterial wall. Cardiovascular diseases due to AS is the leading cause of death. As AS is closely related to Treg/Th17 cell imbalance, the Th17/Treg balance may be a promising therapeutic approach in patients with AS.In this project, taking LOX-1 pathway as the starting point, we aim to evaluate the effect of HUXINFANG on influencing downstream targets Th17/Treg balance by modulating the upstream inflammatory cytokines, in monocyte-derived macrophages, CD4+T lymphocytes, as well as apoE-/- mice. This is the study to explore the anti-AS mechanism of the HUXINFANG using the Th17/Treg balance as a target. .Results of our study will elucidate the anti-atherosclerotic mechanism of HUXINFANG in regulating Th17/Treg balance, and provide scientific basis for the clinical use of HUXINFANG.In addition, we aim to explore the therapeutic mechanism of the TCM principle 'Addressing Both the Symptoms and Root Cause' in treating coronary heart diseases. This will be explored from both aspects: "symptomatic treatment- reducing the intake of proinflammatory substances" and "deal with the root cause- regulating the function of the autoimmune". Therefore, our results will also provide a innovated approach to explain the anti-atherosclerotic mechanism of TCM.

动脉粥样硬化（AS）是血脂驱动的动脉管壁的慢性炎症性疾病，其导致的心脑血管病已成为人类主要致死疾病之一。Th17/Treg细胞失衡与AS密切相关, 重建Th17/Treg平衡可能是治疗AS的具有前景的方法。本研究承接前一个国家自然基金项目，以LOX-1为切入点，以单核细胞源性巨噬细胞、CD4+T淋巴细胞以及ApoE基因敲除小鼠为研究对象，评价护心方通过调控上游炎症因子影响下游CD4+T细胞Th17/Treg平衡的作用，从免疫调节角度探索护心方抗AS的可能作用机制。本研究以Th17/Treg平衡为靶点探索中药复方护心方抗AS机制。研究将阐明护心方调节Th17/Treg平衡抗AS的作用及机制，为护心方的临床应用提供科学依据。同时，也从“治标——减少促炎物质摄入”和“治本——调节自身免疫功能”两方面入手，探讨中医“标本兼治”原则治疗冠心病的疗效机制，为更好地阐释中医药防治AS提供新思路。

动脉粥样硬化（AS）是血脂驱动的动脉管壁的慢性炎症性疾病，其导致的心脑血管病已成为人类主要致死疾病之一。大量研究表明Th17/Treg细胞失衡与AS的发生发展密切相关,重建Th17/Treg平衡可能是治疗AS的具有前景的方法。中医药对免疫调节治疗具有双向调节及多靶点的特点。本项目通过体内和体外实验评价护心方对动脉粥样硬化Th17/Treg平衡的调节效应，从免疫调节角度探讨护心方抗AS的可能作用机制。体外实验以单核细胞源性巨噬细胞、CD4+T淋巴细胞为研究对象，观察护心方对ox-LDL介导的Th17/Treg失衡的调节作用。研究结果发现，护心方通过下调NF-κB/LOX-1减轻巨噬细胞泡沫化程度，并抑制炎症因子释放从而调控Th17/Treg平衡。体内实验通过构建动脉粥样硬化ApoE小鼠模型，从整体角度评价护心方通过调节Th17/Treg失衡起到抗动脉粥样硬化的作用机制。研究结果发现，护心方能减少ApoE-/-小鼠主动脉内斑块的面积，其机制可能是通过抑制炎症因子分泌，进而调控Th17/Treg平衡，减轻病变部位的炎症反应及纤维化程度。研究结果不仅阐明了护心方调节Th17/Treg平衡起到抗AS的作用及机制，也为护心方的临床应用提供科学依据，同时为进一步探索中医药通过免疫调节防治AS提供新的思路。在完成项目研究目标的基础上，进一步开展了护心方指纹图谱建立及含药血清成分分析，其结果为保证试验药物的稳定性及明确护心方药效物质基础提供重要依据。此外，还通过ceRNA芯片结合GSEA分析，构建护心方靶向自噬的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络，并采用分子对接技术筛选护心方组分中靶向调节LOX-1的活性成分，实验结果为从更全面地阐释护心方抗AS作用机制及寻找更多更新的有研究前景的治疗靶点及药效成分提供必要的研究基础和思路。