HCV下调SIRT1信号通路导致肝细胞糖脂代谢紊乱及其在进展性慢性肝病中的作用

Chronic hepatitis C virus (HCV) infection easily causes hepatic steatosis and insulin resistance (IR), which accelerates liver fibrosis and cirrhosis and induces diabetes. Our former work confirmed that HCV infection led to energy, glucose and lipid metabolism disorders of hepatocytes through silent information regulator 1 (SIRT1)- AMP-activated protein kinase (AMPK) signaling pathway and benefited for HCV replication. Utilizing HCV replicon cells and harboring HCV adenovirus vectors mice, we observe the effect of hyper or hypo-expression of SIRT1, AMPK gene on HCV replication, glucose and lipid metabolism of hepatocytes. Utilizing the coculture of replicon cell, HCV antigen, HCV expression vectors with Kuffer cells, sinusoidal endothelial cells, stellate cells, we study the mechanism of inflammatory response, oxidative stress, fibrosis in liver by SIRT1-NFκB, SIRT1-adiponectin, adiponectin receptor-AMPK-SIRT1 signaling pathway in HCV infection, and observe the effect of glucose and lipid metabolism disorders on HCV replication and SIRT1 signaling pathway. From whole, cell, molecular three levels, we illuminate the role of SIRT1 signaling pathway in hepatic steatosis and IR inducing steatohepatitis and fibrosis in HCV infection, lay a foundation for retrieving SIRT1 signaling pathway activity as new target of anti-HCV therapy.

慢性HCV感染易发生肝脂肪变性与胰岛素抵抗（IR），加速肝纤维化、肝硬化进程并导致糖尿病的发生。我们既往研究证实HCV下调SIRT1-AMPK信号通路导致肝细胞能量、糖、脂类代谢紊乱有利于HCV复制。利用复制子细胞模型及携带HCV腺病毒载体的鼠模型，研究SIRT1和AMPK活性变化对HCV复制及糖、脂代谢的影响。利用复制子细胞、HCV抗原、HCV表达载体与Kuffer细胞、肝窦内皮细胞、肝星状细胞共培养，研究HCV通过SIRT1-NFκB、SIRT1-脂联素、脂联素受体-AMPK-SIRT1等信号通路导致肝脏炎症反应、氧化应激、肝纤维化的机制，研究糖脂代谢异常对HCV复制及SIRT1相关信号通路的影响，在整体、细胞和分子水平阐明HCV调控SIRT1信号导致肝脂肪变性和IR促进脂肪性肝炎、肝纤维化进展的机制，为恢复SIRT1活性成为抗HCV治疗的新靶标奠定理论基础。

慢性HCV感染易发生肝脂肪变性与胰岛素抵抗（IR），加速肝纤维化、肝硬化进程并导致糖尿病的发生。尽管直接抗病毒药物可有效地清除HCV，但部分已发生.肝脂肪变性与IR患者仍不断进展为肝纤维化，甚至发生肝硬化和肝癌。通过本课题的研究我们证实HCV复制下调沉默信息调节因子1（SIRT1）-AMP激活的蛋白激酶（AMPK）信号通路及改变下游的糖、脂类代谢的相关基因的表达导致肝细胞能量、糖、脂类代谢紊乱，促进病毒复制；进一步发现这种变是由HCV核心蛋白和NS5A蛋白引起的。HCV复制下调SIRT1信号活化内源性大麻素系统导致糖代谢紊乱。利用复制子细胞和表达HCV核心蛋白的HepG2细胞与Kuffer细胞、肝窦内皮细胞、肝星状细胞共培养，发现HCV感染(尤其是HCV核心蛋白)通过SIRT1-NFκB信号通路活化Kuffer细胞导致炎症反应；通过SIRT1-脂联素信号通路改变肝窦内皮细胞功能导致肝窦微循环障碍；通过脂联素受体-AMPK-SIRT1信号通路活化肝星状细胞导致肝纤维化。高浓度的糖和脂下调SIRT1、AMPK信号表达促进HCV复制；HCV核心蛋白下调SIRT1活性导致小鼠肝脂肪变性。SIRT1激动剂能改善上述变化。这些结果为恢复SIRT1活性成为抗HCV治疗的新靶标奠定理论基础。