NKB/dynorphin参与kisspeptin/GPR54介导的滋阴泻火中药合剂治疗性早熟的神经机制

Precocious puberty is one of the most common pediatric endocrine diseases, the clinical application of Nourishing ″Yin″ -removing ″Fire″ Chinese Herb Medicine treatment of precocious puberty has made a significant effect, but its mechanism is not clear. The GPR54/kisspeptin signaling pathway is a key factor in the puberty initiation, it is the gate of puberty onset. Our previous study found that GPR54/kisspeptin signaling pathway might participate in the central effective therapeutical mechanisms of CHM on precocious puberty. The neurokinin B (NKB) is considered to be another key factor in addition to kisspeptin which plays an important role in the regulation of reproductive endocrinology. The mechanisms of NKB / Dynorphin involved in the CHM mixture treatment of precocious puberty in the view of GPR54 / kisspeptin level would be probed with danazol-induced precocious puberty rat. And the role of NKB/Dynorphin on HPGA function in CHM treatment of precocious puberty would be investigated. It will interpret the mechanism of traditional Chinese medicine by the language of modern medicine, and provide modern scientific basis for the further promotion of traditional Chinese medicine in clinical application.

性早熟为常见的儿科内分泌疾病之一，临床应用滋阴泻火中药治疗性早熟取得了显著的疗效,但其有关机理尚不明确。GPR54/kisspeptin信号通路是青春期启动时的关键因子,是青春期启动的闸门。我们前一课题研究发现GPR54/kisspeptin信号通路参与滋阴泻火中药治疗性早熟的中枢机制。神经激肽B（neurokinkin B, NKB）被认为是除kisspeptin外，在生殖内分泌调控中起重要作用的又一关键因子。本课题拟在达那唑诱导的性早熟大鼠模型上，从NKB/Dynorphin调控GPR54/kisspeptin的合成与分泌以及下丘脑-垂体-性腺轴的功能入手，从多个层次探讨NKB/Dynorphin参与GPR54/kisspeptin在滋阴泻火中药合剂治疗性早熟中枢机制中的作用，用现代医学的语言阐释中药治疗该病的机理，为进一步推广中药在临床应用提供现代科学依据。

性早熟为常见的儿科内分泌疾病之一。本课题在达那唑诱导的性早熟大鼠模型上，从NKB/NK3R、Dynorphin/ KOR-1和谷氨酸NMDA受体及其相关miRNA参与调控下丘脑-垂体-性腺轴的功能入手，从多个层次探讨NKB/Dynorphin、NMDA受体及相关miRNA在滋阴泻火中药合剂治疗性早熟机制中的作用。.研究发现，滋阴泻火中药合剂可显著改善雌性性早熟大鼠的症状。雌性性早熟大鼠青春期启动前，各组大鼠下丘脑ARC和MPO的NKB及NK3R阳性细胞数无明显差异；青春期启动时，各组大鼠下丘脑ARC和MPO的NKB、NK3R阳性细胞数与青春期前相比都有所上升，且模型组明显高于正常组；与模型组相比，中药组下丘脑ARC和MPO的NKB、NK3R阳性细胞数明显减少。青春期启动时，雌性性早熟大鼠下丘脑NKB及NK3RmRNA的表达明显高于正常组，给予大鼠滋阴泻火中药合剂后，下丘脑NKB和NK3R mRNA表达明显下调。.P20时（青春期启动前）模型组大鼠下丘脑PDYN mRNA表达上调，与正常组相比有显著差异；P25时（青春期启动时）模型组大鼠下丘脑PDYN mRNA和蛋白的表达下调，与正常组相比有显著差异；滋阴泻火中药可以显著上调性早熟大鼠下丘脑PDYN m RNA和蛋白的表达水平。.青春期启动时（24日龄）模型组大鼠下丘脑NMDA 受体R1亚基（NR1）mRNA和蛋白表达明显升高，和正常组、溶媒组以及各组青春期启动前相比有显著差异。青春期启动后（29日龄）模型组大鼠组下丘脑NR1mRNA和蛋白表达和正常组、溶媒组，无显著统计学差异，但和模型组青春期启动时相比，显著下降。给予性早熟大鼠NMDA受体拮抗剂MK-801后，大鼠阴门开启时间和模型组相比显著延迟。miR196-b、miR761、miR326、miR664-2参与下丘脑神经元NR1表达的调控。.综上所述，滋阴泻火中药合剂可以通过调节NKB/NK3R、 PDYN/ KOR-1以及NMDA受体及相关microRNA等信号通路，抑制GnRH的合成释放，进而抑制HPGA功能，延缓性早熟大鼠HPGA的启动。这可能是滋阴泻火中药发挥治疗性早熟作用的重要途径。本课题研究为进一步推广中药在临床应用提供了现代科学依据。