肝癌端粒酶升高相关基因甲基化表型筛选

肝癌的早期诊断和预后判断目前缺乏理想的标志物。端粒酶在85-90%的肝癌中高表达，这种广谱性确定了端粒酶作为肝癌标志物的价值，但是端粒酶含有RNA 组分且检测复杂限制了其应用。DNA甲基化具有稳定性好、敏感性和特异性高、便于检测的优点，我们前期研究提示肝癌端粒酶升高与相关基因的甲基化有关，而且收集了端粒酶阳性和阴性的肝癌标本，建立了相应的细胞系。本研究拟应用DNA甲基化芯片在端粒酶阳性和阴性的肝癌细胞及标本中筛选端粒酶升高相关的甲基化基因，采用甲基化特异性PCR法鉴定，确立基因甲基化表型；进一步在肝癌病人血液标本中验证，建立临床标本库和病人的临床资料信息库，通过生物信息学及统计学方法分析端粒酶升高相关基因甲基化表型与肝癌转移复发及预后的相关性，继而对肝炎肝硬化等高危人群进行筛查预测；探讨端粒酶升高相关基因甲基化表型作为肝癌早期诊断及预后判断指标的可行性，为肝癌的诊治研究提供基础。

肝癌是我国特色的恶性肿瘤，且其发生有逐年上升趋势，研究肝癌的发生及治疗机制对提高肝癌病人的生存状况有重要的意义。近年来的研究表明端粒酶的激活及其活性上调是肝癌发病机制中极其重要和关键的一步。本课题的研究表明去甲基化剂5-杂氮脱氧胞苷（DAC）能下调肝癌细胞端粒酶的活性,其作用机制是通过影响端粒酶hTERT基因表达调控的相关分子(p16)的甲基化状态而实现,同时DAC能提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性。肝癌病人总体的化疗效果不佳，原因是由于肝癌对化疗的不敏感。我们的研究表明自噬可能是肝癌对化疗不敏感的机制。同时自噬的激活还有助于肝癌细胞在营养不良的环境中生存。进一步的研究显示自噬的激活参与了肝癌对抗血管治疗的耐受。以上相关的研究成果发表在《World Journal of Gastroenterol》、《Cancer Letters》、《Journal of Cellular Biochemistry 》及《Journal of Molecular Medcine》。