基于黄芩清肺汤的黄芩、栀子饮片“炮制配伍”示范性研究

中医以饮片配伍组方入药是中医治病用药的特色，饮片的药性变化通过复方配伍的整体作用而体现，饮片的炮制方法是以全方的配伍需要而定。由此，本课题首次提出了基于复方的饮片"炮制配伍"新概念。即以黄芩清肺汤为切入点，以其组方黄芩、栀子不同饮片配伍方（2:1）为研究对象，通过对不同饮片炮制配伍的药效物质基础及其"苦寒"药性的比较研究，并结合数学多元回归分析方法，揭示黄芩清肺汤不同饮片炮制配伍前后物质基础内涵及其药性的整体变化规律，阐明黄芩、栀子饮片炮制配伍的科学内涵；同时从复方配伍的角度，阐释黄芩、栀子饮片炮制原理的科学内涵；为临床合理应用饮片提出科学建议，为深入开展中药饮片炮制配伍研究提供研究范例。在此基础上，构建"炮制配伍"理论研究的新思路，填补国内研究空白，丰富中药炮制理论；本研究将为其它同类复方的研究和应用提供有益的参考，因而具有较高的理论意义和实用价值。

以复方为载体开展饮片生熟异用的科学性研究，是中药炮制学科朝向临床应用研究的必由之路。本课题基于所提出的“炮制配伍”概念，以黄芩清肺汤4个不同饮片配伍方（2:1）为研究对象，以正交实验设计确定了饮片配伍方的最佳合煎工艺。从黄芩中分离鉴定了16个化学成分，建立了一种从栀子中快速分离制备6个环烯醚萜类成分的方法。比较研究了4个饮片配伍方2个检测波长下的HPLC指纹图谱，通过与单煎饮片的对比分析发现，254nm下的4种饮片配伍的HPLC整体图貌差异不显著，40个色谱峰中，15个色谱峰来源于栀子，25个色谱峰来源于黄芩；440nm下的HPLC图谱变化显著，分别可检测出20个（配伍1、配伍3，17个色谱峰来源于栀子）和16个色谱峰（配伍2、配伍4，13个色谱峰来源于栀子），体现了栀子炮制品种的差异；通过主要色谱峰指认和HPLC-MS/MS分析，鉴定了4类共32个化合物质谱信息，推断了3个化合物的分子量，基本明确了4个饮片配伍方的色谱峰归属来源饮片及其化学成分组成。首次建立了以2个检测波长（254nm，440nm）同时测定黄芩栀子饮片中4类共24个化学成分的含量测定方法，研究发现4种饮片配伍方主成分发生明显变化，饮片配伍后栀子中环烯醚萜及色素总量明显上升，黄芩中主成分黄酮总量略增加，不同饮片配伍方的含量差异，体现了来源饮片的关联性。以各单味饮片为对照，4种饮片配伍煎煮液的红外特征光谱也存在明显的差异。药效学研究表明，4种不同饮片配伍方的抗炎作用相当，大鼠肿胀模型中，配伍3抑制率最高且起效快，解热作用以配伍4作用最强；止血以生黄芩和酒黄芩分别与焦栀子（2:1）配伍后为佳；体内抗病毒试验显示，配伍3可明显降低肺指数值；各样品对所试的金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠埃希氏菌的抑菌效果不尽一致，提示在黄芩、栀子饮片在临床配伍时应针对病症科学合理选用饮片。不同饮片配伍方对线粒体呼吸作用的相关指标有显著性差异，配伍1、配伍2优于配伍3、配伍4，且配伍方优于单个饮片，为探索药物炮制前后的药性变化情况提供了新的技术手段。动态血清化学研究表明但各饮片配伍样品不同时间点血清指纹谱的略有差别，发现21个入血成分，初步阐明黄芩栀子不同饮片配伍方的效应物质群。本课题全方位、多角度地阐释了黄芩栀子饮片配伍的现代物质基础内涵及其药效学差异性的变化规律，为基于生熟异治的饮片临床合理应用提供了实验依据。