检测NPM基因突变并探讨NPM对白血病细胞生物学特性的影响

最近国内外文献报道近三分之一的急性髓系白血病患者可发生核仁磷酸蛋白（NPM）基因突变及NPM蛋白胞浆移位，提出一种新的白血病亚群（NPMc+ AML）。它的出现有助于完善白血病的WHO分型、预后判断和微量残留病监测，因此迫切需要建立适合临床的NPM突变检测方法，并进一步阐明NPM突变在白血病发病中的作用机制。本项目首先采用PCR技术在分子水平上检测NPM基因突变，同时利用荧光标记自制的突变型NPM蛋白单抗在细胞水平上检测胞浆蛋白；然后通过转染将携NPM突变基因或者NPM基因RNA干扰片段的病毒重组体导入白血病细胞系中，采用软琼脂克隆形成实验、FCM、RT-PCR和滤膜小室法等方法检测靶细胞增殖潜能、周期分布、凋亡特性和趋化性的改变，观察NPM突变对白血病细胞生物学特性的影响。本研究将推动NPM突变这项新指标在临床血液学检验的广泛应用，同时也有助于了解NPM基因突变在白血病发病中的分子机制。