基于PPARα/γ信号通路探讨升清降浊法对糖尿病前期糖脂代谢紊乱的干预机制

胰岛素抵抗是糖尿病前期糖脂代谢紊乱发生发展的关键病理因素，PPARα/γ调控糖、脂代谢多种关键基因的表达，其所介导的信号通路在增加胰岛素敏感性，改善脂质代谢方面发挥着重要的作用。前期研究结果显示，升清降浊法具有改善胰岛素敏感性，降低血糖，降低血胆固醇、甘油三酯的作用，同时可以减轻体重。其胰岛素增敏、降脂双向调节作用机制可能与激动PPARα/γ及其信号通路有关。本课题采用自发性胰岛素抵抗糖尿病KK-Ay小鼠及L-谷氨酸钠(MSG)胰岛素抵抗肥胖大鼠为观察对象，以升清降浊法为干预手段，运用DNA转染法、免疫组化法、实时定量PCR等技术，研究升清降浊法与PPARα/γ激动及其所介导的胰岛素增敏、降脂信号传导通路的相关性，从整体、细胞、分子水平阐明升清降浊法干预糖、脂代谢紊乱双向调节的作用靶点及机制，为中医学确定干预糖尿病前期糖、脂代谢紊乱治则治法提供实验依据。

研究背景：本课题采用自发性胰岛素抵抗糖尿病KK-Ay小鼠及胰岛素抵抗肥胖MSG大鼠为观察对象，以升清降浊法为干预手段，以PPARα、PPARγ为作用靶点，研究探讨升清降浊法干预糖、脂代谢紊乱双向调节的作用靶点及机制。.研究内容：升清降浊法对PPARγ、PPARα受体激动活性的影响；升清降浊法对PPARγ信号通路胰岛素增敏作用机制的研究；升清降浊法对PPARα信号通路降脂作用机制的研究。.研究结果：升清降浊法对PPAR-α和PPAR-γ均有明显的激活作用。能上调KK-Ay小鼠肝脏中PPARγ表达,上调KKAy小鼠肝脏和骨骼肌中InsR、IRS-1、IRS-2、GLUT1及Pi3K基因的表达,下调KKAy小鼠肝脏组织中PEPCK、G6P基因的表达并上调KKAy小鼠肝脏组织中SHP基因的表达,对KKAy小鼠肝脏中FBP1基因具有反向调节的作用。明显降低MSG大鼠糖耐量和胰岛素耐量血糖曲线下面积，改善糖耐量和胰岛素耐量异常；有降低MSG大鼠随机血糖的趋势，降低FINS、NEFA及肝脏糖原的含量。明显降低MSG大鼠血清Adiponectin、Leptin蛋白的表达。上调MSG大鼠骨骼肌组织中PPARγ、Adiponectin、IRS-1、IRS-2、GLUT4、及肝脏组织中PEPCK、SHP基因表达；下调骨骼肌IR、Leptin、TNF-α、PI-3K、及肝脏组织中G6P、 FBP1基因表达。能增加KKAy小鼠肝脏、骨骼肌组织中PPARα、APOA-V的表达，下调KKAy小鼠骨骼肌APOC-Ⅲ 基因表达；上调骨骼肌组织中LPL 基因的表达，下调肝脏组织中LPL基因的表达。能上调KKAy小鼠肝脏组织中ACOX1、LBP、DBP基因及骨骼肌组织中ACOX1基因的表达。能明显上调KKAy小鼠骨骼肌CPT1 基因的表达，下调KKAy小鼠肝脏组织中CPT1基因的表达。明显降低MSG大鼠血清及肝脏TC、TG、LDL-C含量，提高MSG大鼠肝脏中HDL-C含量，改善MSG大鼠脂质代谢紊乱，并且明显改善肝脏脂代谢功能异常。能够上调MSG大鼠肝脏中PPARα、LPL、ApoA-V、CPT1、ACOX1、LBP、DBP的表达。同时下调MSG大鼠肝脏载脂蛋白ApoC-Ⅲ表达。.结论：PPARα、PPARγ信号通路的激活是升清降浊法调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗、治疗2型糖尿病的作用机制之一。