虎尾轮根抗类风湿性关节炎的活性成分及作用机制研究

最新研究表明白细胞介素-18(IL-18)在类风湿性关节炎(RA)这种以Thl反应为主的疾病中起重要作用。虎尾轮为台湾十大特殊药草之一，在我国享有很高声誉。目前，国内外对虎尾轮根研究甚少，其化学成分和抗类风湿性关节炎生物活性研究未见报道。申请者首次发现虎尾轮根正丁醇部位抗类风湿性关节炎活性强于雷公藤多苷，表现出了对IL-18的高抑制性。化学成分预试其含有30余种三萜皂苷类成分，已分离到的三个新的结构新颖的含五个糖的双糖链齐墩果烷型三萜皂苷类成分显示出颇有兴趣的抗RA及抑制IL-18活性构效关系。本研究将在等剂量条件下，以抗RA及抑制IL-18活性为指标，进行虎尾轮根抗类风湿关节炎活性化合物的分离及结构鉴定；探讨活性化合物抑制IL-18活性从而抗类风湿关节炎的作用机制。

本项目以豆科狸尾豆属植物：虎尾轮和中华狸尾豆为研究对象。. 利用肾阳虚小鼠模型对虎尾轮根乙醇粗提物，乙酸乙酯部位，正丁醇部位进行初步筛选。虎尾轮根提取物的总膏、乙酸乙酯部位、正丁醇部位可明显提高小鼠的食欲、增加体重,促进生长发育,增加脾脏、胸腺重量,提高脾脏和胸腺指数，可明显减轻肾阳虚小鼠生殖器官萎缩，有抗疲劳作用，可提高小鼠的应激能力。从虎尾轮根乙醇提取浸膏中共得到18 个单体化合物，通过理化常数测定、光谱分析及与标准品对照鉴定了其中的14 个化合物。化合物SYC-7, 8, 9, 11, 12, 13, 14, 17, 18 均为首次从该植物中分离得到。. 通过对佐剂性类风湿关节炎大鼠使用不同剂量的中华狸尾豆乙酸乙酯部位，水部位和总黄酮苷，比较各组大鼠的药效。以大鼠足跖肿胀度、胸腺系数、脾脏系数指标为研究对象，结果表明，水部位剂量组3（160 mg/kg），总黄酮苷剂量组2（10 mg/kg），3（20 mg/kg）, 4（100 mg/kg）对大鼠左后足跖的肿胀有明显的抑制作用(P<0.05)。因为肿胀是一般的炎症反应，提示这些组可能具有一定的抗炎作用。在与免疫系统相关指标方面，乙酸乙酯给药剂量组2（40 mg/kg），3（80 mg/kg），4（160 mg/kg）明显减小因免疫功能异常增强而升高的胸腺系数(P<0.05)、乙酸乙酯剂量组1（20 mg/kg），2，3，4明显减小脾脏系数(P<0.05)，剂量组3、4降低作用尤其明显，效果好于剂量组2。总黄酮苷剂量组3可以显著减小胸腺系数和脾脏系数 （P<0.05）。总黄酮苷剂量组1（2 mg/kg）,2,4可以显著减小脾脏系数（P<0.05）。提示乙酸乙酯剂量组2（40 mg/kg），3（80 mg/kg），4（160 mg/kg）和总黄酮苷剂量组3（20 mg/kg）可能具有一定的免疫抑制作用。在其化学成分的研究中，从中华狸尾豆的乙醇提取总浸膏中分离得到45个化合物，鉴定其中41个，共有8类化学成分，分别为：倍半萜类8个；三萜类2个；黄酮类8个，其中6个为异黄酮类化合物；木脂素类4个，小分子糖苷类7个，酚酸类5个，脂肪酸类5个，甾体类2个。所有化合物均为首次从该植物中分离得到，1个为新化合物。