Wnt信号对关节软骨间充质祖细胞老化作用的研究

关节软骨间充质祖细胞(MPCs)老化是骨性关节炎(OA)发生的重要环节，我们前期发现:OA患者MPCs增殖及向软骨分化能力下降，但机制不清。新近发现：Wnt信号激活与干细胞老化密切相关。鉴于p53/p21通路作为细胞老化的重要通路，且Wnt通路与p53/P21通路存在交联，推测：激活的Wnt信号可能通过p53/p21通路诱导MPCs老化，促进OA的发生发展。本项目拟通过研究正常与OA患者关节软骨和MPCs的Wnt信号表达，及Wnt信号激活对MPCs增殖、向软骨分化及SAβ-gal活性的作用，证明Wnt信号激活促MPCs的老化；通过构建p53报告质粒，观察Wnt信号激活与阻断对MPCs中p53表达的作用，利用siRNA抑制p53表达观察对MPCs老化的影响，探讨p53/p21通路在Wnt信号激活促MPCs老化中的介导作用及对MPCs老化的调控，为防治OA提供新的理论依据及方法。

背景 关节软骨间充质祖细胞(MPCs)老化是骨性关节炎(OA)发生的重要环节，我们前期也发现:OA患者关节软骨MPCs增殖及向软骨分化能力下降，但关节软骨MPCs 老化的调控机制并不清楚。方向 激活的Wnt信号可能通过p53/p21通路诱导MPCs老化，促进OA的发生发展。主要内容 通过研究正常与OA患者关节软骨和MPCs的Wnt信号表达，证明Wnt信号激活对MPCs的老化的影响；通过构建p53报告质粒，观察Wnt信号激活与阻断对MPCs中p53表达的作用，从而推断Wnt信号介导p53/p21通路诱导MPCs老化的可能机制。重要结果及关键数据 1.正常人MPCs中Wnt1和Wnt3a的mRNA表达较OA患者MPCs中的低，且差异显著。2. MPCs在 Wnt 信号激活时增殖能力降低，阻断 Wnt 信号增殖能力增强。3. MPCs在激活Wnt 信号 的情况下成软骨诱导后CollagenII、aggrecan、SOX9 的mRNA 表达量与正常MPCs成软骨诱导时均大幅减低，有明显差异。4. MPCs中的Wnt 信号阻断后P53基因及蛋白表达较未激活的MPCs中的少，差异显著。5. 正常人MPCs中的Wnt 信号激活后P53启动子荧光素酶表达水平表达较正常人MPCs大幅增多,差异显著。科学意义 Wnt 信号激活促MPCs 老化，p53/p21 通路在Wnt 信号激活促MPCs 老化中存在可能的介导作用，这为OA的防治提供了新的理论依据及方法。