视黄酸调节谷氨酸受体在突触膜上的转运和通过ERK/CREB信号通路影响在体突触可塑性

视黄酸在体外培养神经元和脑片上快速调节突触可塑性，而在体影响并不清楚。视黄酸近来也被认为调节第二信使依赖的快速非基因组信号通路。本课题探索视黄酸对在位LTP的影响，观察视黄酸对在位LTP诱导后不同时间点(0min,20min,4h)AMPA受体和NMDA受体各亚型在突触膜上转运的影响，鉴定其对在位LTP的影响机制；观察视黄酸对在位LTP诱导后不同时间点ERK1/2和CREB通路的调节，观察此调节是否为蛋白质合成依赖和RARα介导，验证视黄酸通过RARα介导非基因途径快速调节转录因子的磷酸化从而影响LTP的假设。本课题有助于认识视黄酸对在体突触可塑性的调节,帮助揭示视黄酸治疗维生素A缺乏导致学习记忆功能障碍的机制。

视黄酸已被临床报道在抑郁症和情绪障碍中扮演重要功能。本实验室之前的研究结果发现：1）慢性（6周）全反式视黄酸给药诱导大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能的高度活化，伴随出现焦虑相关的行为；2）视黄酸受体-α(RAR-α)能够被募集到促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)基因的启动子区域。然而，视黄酸对HPA轴调节的具体机制目前仍未完全阐明。.本课题以成年大鼠为模型，采用侧脑室注射的方法，研究慢性视黄酸对HPA轴相关主要指标的效应。慢性视黄酸处理后，检测不同分组动物的抑郁行为。地塞米松抑制实验用来检测糖皮质激素受体(GR)介导的对HPA轴的负反馈控制。抗抑郁药物米非瑟酮(RU38486)用于检测修复功能。下丘脑室旁核区域的CRH, c-fos和RAR-α和GR免疫阳性细胞被定量比较。最后，体外细胞实验用于观察视黄酸对GR介导的糖皮质激素对CRH转录抑制的调节。.给视黄酸或视黄酸受体-α选择性激动剂都能够在2小时内快速上调血浆皮质醇浓度。慢性视黄酸给药引起了HPA轴的激活，表现在血浆皮质醇浓度升高和出现典型抑郁行为。下丘脑室旁核区域的CRH, c-fos和RAR-α免疫阳性细胞显著增多，而GR免疫阳性细胞数目却显著降低。进一步分析发现室旁核区域的RAR-α和GR免疫阳性细胞数目成显著负相关。地塞米松抑制实验发现GR的激动剂糖皮质激素在视黄酸处理大鼠中不能抑制血浆皮质醇的分泌。以上变化能够被5天的米非瑟酮处理所快速修复。体外实验进一步验证了视黄酸干扰了GR介导的糖皮质激素对CRH转录的抑制。.我们得出结论，除了经典的RAR-α介导对CRH的转录水平调节，视黄酸破坏GR介导的负反馈可能代表引起视黄酸上调HPA轴的一条平行通路；这可被抗抑郁药物米非瑟酮所快速修复。