类风湿性关节炎血清特异miRNA的筛选及功能的初步分析

类风湿性关节炎（RA）的发病机理不清，目前只能进行对症的抗炎治疗。因此，有必要从发病的上游寻找关键分子或环节，以便更有效地指导RA的诊断和治疗。miRNA是一类内源性非编码小RNA，可负性调节靶向mRNA，被认为是调控生命基本过程的关键上游分子。最新的研究证实，血清中存在疾病特异性的miRNA表达谱，且它们具有很好的稳定性，这使得miRNA可作为一类新的血清生物标志物,用于RA的早期诊断以及治疗靶标。我们课题组多年来一直从事RA发病机理的相关研究工作，目前已经收集了大量RA患者的血清和滑膜组织。本研究旨在结合我们已有的工作基础和这方面的研究空白，大规模筛选RA患者血清特异的miRNA分子，并分析其细胞来源及功能，探讨其与RA病理进程的相关性，为RA的早期诊断和治疗提供新的思路。

我们在国际上首次利用Solexa测序技术，对RA患者血清特异性miRNA分子进行了筛选，发现43个miRNA分子在RA中表达显著下调，39个miRNA分子在RA中表达显著上调。经过实时荧光定量PCR验证，发现与炎症基因表达相关的mir-30d-3p在RA中的检出率一致，呈现高表达的趋势，提示其作为RA生物学标记物的价值。此外，还发现mir-16在RA血清中和II型胶原诱导的RA滑膜细胞中的表达均下调，由于生物信息学预测mir-16的靶基因为关节软骨破坏的关键分子MMP-13，这一结果较好地解释了RA中高表达的MMP-13水平，也为RA的诊断和治疗提供了靶点。