新疆维、汉民族膝骨性关节炎围手术期中医证型及蛋白质组学分子表达机制的研究

Project in early "xinjiang uygur osteoarthritis genetic gene expression patterns and their diversity research" on the basis of the first established by the method of clinical cross-sectional study knee replacement perioperative TCM syndrome in patients with changes in the characteristics and distribution of, and then USES the two-dimensional gel electrophoresis (2 DE), mass spectrometry (MS) and rt-pcr technique in xinjiang, the han nationality patients with knee osteoarthritis cartilage, synovial membrane, screening and identification of the protein in joint fluid. Discussion and analysis, the han nationality knee replacement perioperative TCM syndrome change characteristics and the distribution characteristics, and the specificity of the knee osteoarthritis pathogenesis proteins with differences in protein, and from the perspective of gene regulation, protein expression on explain the possible mechanism of the disease, the disease through the project is expected to find new knee osteoarthritis pathogenesis related protein - molecular markers, identify two dimension, han ethnic differences between patients with knee osteoarthritis, eventually provide theoretical basis for diagnosis and treatment of osteoarthritis patients in xinjiang.

项目拟在前期“新疆维吾尔族骨性关节炎遗传基因表达谱及其多样性研究”的基础上首先通过临床横断面调查研究的方法确立膝关节置换围手术期患者中医证候变化的特点与分布规律，继而采用双向凝胶电泳技术(2-DE)、质谱技术(MS)和RT-PCR等技术对新疆维、汉民族膝骨性关节炎患者软骨、滑膜、关节液中的蛋白质进行筛查与鉴定。探讨与分析维、汉民族膝关节置换围手术期中医证候变化特点与分布特征，以及膝骨性关节炎发病的特异性蛋白与差异性蛋白，并从基因调控、蛋白表达的角度上阐释该病发病的可能机制，通过本项目有望在发现膝骨性关节炎发病新的相关蛋白-分子标记物，找出维、汉两个民族膝骨性关节炎患者之间的差异性所在，最终为新疆骨性关节炎患者的诊疗提供理论依据。

本项目研究对象为 2017年 1月－2017年 12月期间在新疆医科大学第四附属医院骨科住院并自愿接受膝人工关节置换手术的患者，总计400例，术后随访人数229例；通过临床横断面调查研究发现膝关节置换围手术期患者中医证候变化的特点以及分布规律。其中发现，KOA以女性多发。年龄跨度为43～ 80岁，平均年龄( 65.4 ± 6.20 )岁，超过 64 岁以上的患者占病例总数的 57.7 %。在 300 例患者中，病程跨度为 2～26年，中位数为 7 年，平均病程( 7.4 ± 3.51 )年。辨证要素中“肾阴虚”、“肾阳虚”在整个 KOA围手术期均有较高的发生率，为主要辨证要素贯穿 KOA围手术期的始终，提示老年人肾虚是本病发病的内因，其原因与肾主骨，而患者年过半百，肾水亏虚，不能荣骨而为肿，发为“骨痹”。另本病多伴有血瘀阻络或寒湿困重，因而“血瘀”、“寒湿”辨证要素在术前发生率较高。术后 1周，因手术对机体有一定的损害，导致患者出现气虚之征象，严重则以阳虚为主。脾为后天之本，气血生化之源，脾气亏虚，水湿内停，则为“痰”;另术后脉络受损，则为“气滞”、“血瘀”。术后 2周，辨证要素仍以“气滞”为主，外达不通则内生“湿热”。术后3周，患者整体症状整体趋于均衡，但仍以虚证为主。另发现:辨证要素中，湿热为少见的辨证要素，其因有二，一则整体样本例数偏少，二是将湿、热合为一个辨证要素，相互混杂影响所致，具体还有待进一步深入调查研究。同时，本课题组对术后维、汉两个民族膝骨性关节炎患者软骨、滑膜、关节液中的蛋白质以及水通道蛋白进行筛查与鉴定，通过收集临床术后维吾尔族、汉族患者非膝骨性关节炎患者与膝骨关节炎患者的软骨、滑膜、关节液样本，运用nanoUPLC EASYnLC1200质谱检测平台，采用串联质谱标记技术TMT蛋白组学的检测方法，共鉴定到 5317个蛋白(groups)，30138条多肽；经过预处理后5194个检测蛋白被保留。