阻断Notch信号途径调控Th细胞分化干预自身免疫性心肌炎的实验研究

Myocarditis is one of the important causes of dilated cardiomyopathy and heart failure, its precise pathogenesis remains unclear. To date, there is no universally accepted effective therapy for myocarditis. It has been reported that it is a CD4+T cell-mediated disease, and Th imbalance plays crucial roles in the induction of myocarditis and in the progression of myocardial injury in this disease. .Notch signaling is stenoplastic during evolution of the biosystem. A growing body of evidence supports a role for Notch signaling in regulating T cell differentiation. The effects of Notch signaling have being taken more and more attention for the development of autoimmune disease. However, reports in this field are still relatively rare..In the present study, the experimental model of autoimmune myocarditis（EAM）model has been established and Notch signaling blockades have been tested in the model and the effects on the development of this disease have been investigated. We also investigate whether activation of the Notch pathway is involved in the process of EAM. Further more,it aims at investigating the immune mechanisms involved. In addition, the present study might provide a promising new strategy for myocarditis..To our knowledge, at domestic and abroad, there is no report about Notch signaling and myocarditis, and the investigations of Notch signaling blockade alleviating experimental autoimmune myocarditis by regulateing the Th differentiation have not been addressed.

心肌炎是引起扩心病及心力衰竭的一个重要原因，其确切机制仍然不清楚，迄今为止，也并没有公认有效的治疗措施。有研究表明心肌炎是CD4+T细胞介导的自身免疫性疾病，Th平衡的偏移对心肌炎的诱导产生以及心肌损伤的发生发展发挥了极其关键的作用。.Notch信号通路是生物体进化中高度保守的信号转导通路，越来越多的研究表明该通路参与调控T细胞的分化。随着研究的不断深入，Notch信号通路在自身免疫性疾病发生发展中发挥的作用吸引了人们的注意力，但关于这方面的研究仍见较为少见。.本研究建立实验性自身免疫性心肌炎模型（EAM），观察Notch途径信号的激活，并应用Notch信号通道阻断剂干预EAM小鼠，观察其作用，并且深入分析其中的相关免疫调控机制，以期为心肌炎提供新的治疗策略。.迄今为止，目前国内外并没有Notch信号通路与心肌炎的相关研究报道，也没有阻断Notch信号通路通过调控Th亚群改善心肌炎的研究

心肌炎以心肌细胞的变性、坏死及单个核细胞浸润为特征，伴或不伴有心肌纤维化，是一种特殊的心肌炎症疾病。部分患者可转化为扩张型心肌病，出现进行性心力衰。迄今为止，心肌炎的发生发展，以及演变为扩张型心肌病的病理生理机制仍然不十分清楚，临床上对此疾病并无有效的治疗手段，而只是针对相关症状及并发症的治疗，并非针对疾病本身。有研究表明心肌炎是CD4+T细胞介导的自身免疫性疾病，Th细胞的分化失衡在心肌炎的发生发展过程中发挥了极其关键的作用。另外，Notch信号通路是生物体进化中高度保守的信号转导通路，有研究表明该通信号通道参与调控Th细胞的分化，并在自身免疫性疾病的发生发展中发挥重要的作用。本课题通过建立实验性自身免疫性心肌炎模型（EAM），观察Notch信号通道的激活及Th细胞分化情况，应用Notch信号通道阻断剂（抗DLL4单克隆抗体及γ-分泌酶抑制剂GSI）干预EAM鼠，旨在探讨Notch通道阻断剂对EAM发生发展所起的作用，并且深入分析其相关的免疫机制。.研究发现，Notch信号通道阻断剂显著地改善了EAM鼠受损的心功能和心肌病理损伤；降低了抗心肌肌凝蛋白抗体的产生；抑制了抗原特异性淋巴细胞增值反应。我们的结果显示，EAM组Notch1, Notch2, Notch4, DLL-1及 DLL-4的蛋白和基因水平均有不同程度的增加，而在Notch通道阻断剂治疗组中均显著降低。另外，流式细胞术结果提示EAM组Th1 和Th17细胞上调，同时伴有Th2和Treg细胞下调，而Notch通道断剂治疗后逆转了这种Th细胞亚群平衡，该结果与ELISA检测的各Th细胞亚群分泌的细胞因子变化水平一致。本研究提示Notch信号通路的激活参与了EAM的发生发展过程，阻断Notch信号途径可以改善EAM，其相关机制很可能是通过修正Th细胞亚群的分化失衡。这一发现为心肌炎及其他自身免疫性疾病免疫调节治疗提供了新的治疗靶点。