中国晚期NSCLC患者EGFR-TKIs继发耐药分子机制研究及外周血无创检测平台建立

Epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitors (TKIs) have become an indispensable therapy for patients with advanced non-small-cell lung cancer (NSCLC). In clinical practice,however, failure of the treatment was mostly resulted from acquired resistance. Recent researches have identified some molecular mechanisms of acquired resistance to EGFR-TKIs, such as T790M mutation,abnormal activation of the downstream signaling pathway of EGFR, miscellaneous genes expression and transition to small cell lung cancer. But the correlation between these mechanisms and their predictive value in this process still keeped unclear. Here we will detect expression of the related genes variations in both tumor tissue and peripheral blood plasma DNA before and at the time of acquired resisitance of EGFR-TKIs to confirm the known molecular mechanisms and explore the potential factors. We aim to establish an noninvasive detection platform of peripheral blood plasma and set up a predictive model by dynamically monitoring the gene changes during EGFR-TKIs treatment. This may greatly help to effectively screen the occurance of acquired resistance to EGFR-TKIs and improve the molecular targeting treatment by individual genotyping.

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）已经成为晚期非小细胞肺癌不可或缺的治疗手段，而继发耐药是导致其治疗失败的最重要原因。已有研究显示T790M 突变、EGFR下游信号通路改变及某些基因表达异常或肿瘤表型改变均与之相关，但其彼此间的相关性、对继发耐药的预测程度尚有不清楚。本研究通过检测EGFR-TKIs继发耐药NSCLC患者治疗前后组织及外周血中相关耐药基因差异，验证已知分子机制，同时采用深度测序等方法发现潜在的耐药原因，通过统计学及数学方法推导出分子预测模型，并建立外周血检测平台，为动态监测耐药发生及筛选克服EGFR-TKIs继发耐药的治疗方法提供有力支持，使基因分型基础上的个体化靶向治疗更臻完善。

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂已经成为晚期非小细胞肺癌不可或缺的治疗手段，而耐药是导致其治疗失败的最重要原因。本研究通过动态检测EGFR-TKIs耐药NSCLC患者治疗前后组织及外周血中相关耐药基因差异，验证已知分子机制，同时采用深度测序等方法发现潜在耐药原因，为动态监测耐药发生及筛选克服EGFR-TKIs继发耐药的治疗方法提供了数据支持。回顾性研究部分发现：1）一线治疗前血与组织均检测到突变的患者预后最佳，而二线治疗前血检测到突变的患者较组织突变型预后更好。2）外周血肿瘤标志物是由机体对肿瘤反应或肿瘤组织自身产生的肽类物质, 可反映肿瘤状态，与外周血基因检测相似，我们分析了患者血清肿瘤标志物与一线EGFR-TKIs治疗晚期EGFR突变型肺腺癌患者疗效相关性。3）携带有EGFR敏感突变的肺腺癌对EGFR-TKIs治疗原发耐药（指EGFR敏感突变腺癌患者EGFR-TKIs治疗PFS小于3月）的原因进行了研究，发现原发耐药组特有的高频基因： 54.55%（6/11）中携带已知耐药机制（2例含MET扩增；2例含T790M突变；1例含Her2扩增；1例含PTEN缺失）；45.45%（5/11）携带可能耐药机制（2例患者含TGFBR1突变；1例患者含TMPRSS2融合基因；1例含有EGFR多点突变；1例患者存在BIM缺失多态性且为EGFR L861Q突变）。原发耐药组（C:G→T:A）突变的比例显著高于敏感组（0.54 vs 0.39, P=0.012）。前瞻性研究部分通过靶向治疗期间每 2 个月复测血液标本直到疾病进展，发现接受吉非替尼治疗8周时，血液 EGFR 突变清除组 PFS显著长于未清除组（11 个月vs. 2.1 个月）。EGFR T790M 突变出现的中位时间为7.6个月，而临床耐药的中位时间为9.5个月，二者间隔时间为2个月。基线NGS数据单纯EGFR敏感突变者 mPFS 为 13.2 个月；EGFR 敏感突变伴 TP53 突变患者 mPFS 为 9.3 个月；若患者伴随多种基因突变，包括致癌基因、肿瘤抑制基因，其中位 mPFS 仅为 5.5 个月（P<0.05）。以上研究结果通过对血液基因标志物动态监测，发现先于临床进展的标志物进展，证实了本研究预期的结果；同时对原发性耐药及三代TKI耐药的机制进行了NGS探讨，发现了潜在影响疗效的因素。