米非司酮对子宫树突状细胞分化和功能的调节及机制研究

Mifepristone is a progesterone receptor modulator and has been the first choice for the first trimester abortion in some regions. Recently, numerous studies showed that low-dose mifepristone can be used to achieve the purpose of contraception,the so called "endometrium contraception". However, the mechanism about endometrial contraception is still need to be eluciated. Therefore, in order to investigate the effects and possible mechanisms of mifepristone in the regulation of uterine dendritic cells (DC), uterine DC from human and mouse endometrium will be used. In our study, in vivo and in vitro study will be done to investigate the possible mechanism of maternal acquired immune, in the cell and molecular levels, regulated by mifepristone through the methods of immunohistochemistry, western blot, ELISA, specific small-interering RNA (siRNA), flow cytometer and so on. We hope that current study will provide something new to the development of ideal contraceptive method, the understanding and treatment of diseases in human reproduction.

米非司酮作为孕激素受体调节剂，是目前药物流产的常规用药。近年的研究表明，低剂量的米非司酮具有"内膜避孕"作用，然而其作用的免疫学机制却并不清楚。因此，在本研究中我们选用围着床期女性和小鼠子宫内膜组织中的树突状细胞为研究对象，就上述疑问探讨米非司酮对树突状细胞分化和功能的调节及其可能的作用机制。在本研究结合体内和体外实验，从细胞和分子水平，利用免疫组织化学、Western blot、酶联免疫吸附试验（ELISA）、siRNA干扰及流式细胞检测等相关技术，探讨米非司酮在胚胎植入过程中对母胎界面获得性免疫的调节及机理，为新避孕途径的开发以及人类的生殖过程中相关疾病发生机理和治疗研究提供新的思路。

米非司酮是一种人工合成的19-去甲基睾酮衍生物，具有抗孕激素和糖皮质激素作用。从首次合成米非司酮以来，米非司酮已被广泛用作抗早孕治疗，并成功用于紧急避孕．多年来的基础和临床研究表明，米非司酮在妇产科学、内分泌学、肿瘤学及免疫学等多个领域表现出一定的应用潜力。米非司酮作为孕激素受体调节剂，是目前药物流产的常规用药。近年的研究表明，低剂量的米非司酮具有“内膜避孕”作用，然而其作用的免疫学机制却并不清楚。树突状细胞是目前已知的机体内功能最强大的专职性抗原提呈细胞。吲哚胺2，3-双加氧酶(IDO)是细胞内的一种催化色氨酸分子沿犬尿酸途径进行分解代谢的限速酶。IDO主要表达在树突状细胞，在维持早期妊娠中发挥重要作用。IDO+DC能够抑制T细胞活化与增殖，促进T细胞的凋亡，诱导调节性T细胞的产生。因此，在本研究中我们选用外周血树突状细胞为研究对象，就上述疑问探讨米非司酮对树突状细胞分化和功能的调节及其可能的作用机制。在本研究结合体外实验，从细胞水平，利用Western blot、酶联免疫吸附试验（ELISA）、Real-time RT-PCR及流式细胞检测等相关技术，探讨米非司酮在胚胎植入过程中对母胎界面获得性免疫的调节及机理，为新避孕途径的开发以及人类的生殖过程中相关疾病发生机理和治疗研究提供新的思路。本研究发现米非司酮诱导DC表型成熟，促进DC分泌IL-12，这可能引发母体对半同种异体胎儿抗原免疫排斥，达到抗着床避孕。 在一定浓度范围内，米非司酮对DC的促成熟作用存在量效关系。经米非司酮处理后的DCs抑制Tregs表达FOXP3和IL-10，提示米非司酮在DCs对获得性T细胞免疫应答的调节中发挥作用。米非司酮降低DCs中 IDO mRNA及蛋白的表达，降低IDO酶活性；IDO抑制剂1-MT可逆转米非司酮处理后的DCs抑制Tregs表达FOXP3和IL-10，提示低剂量米非司酮通过降低IDO调节DCs 功能。这可能是米非司酮避孕的免疫学机制。此研究为低剂量米非司酮作为内膜避孕药提供了依据。