脂筏通过质膜Ca2+-ATPase调控细胞Ca2+外流的机理

生物膜具有脂筏结构且作为功能平台参与众多生物学功能的观点已日益被广泛接受，但脂筏调控膜蛋白功能的机理尚不清楚。本申请以质膜Ca2+-ATPase（PMCA）为研究目标，研究其在细胞质膜上的定位及其受脂筏调控的机理。已知PMCA位于脂筏上并具有较高活性，而非脂筏区上的PMCA活性较低，但脂筏调控PMCA活性的机理尚不清楚。我们在刚结题的基金委重点基金资助下，发现脂筏的主要成分之一－神经节苷脂调控PMCA的活性。本申请以在体和体外重组相结合，通过分子生物学、蛋白质生化、细胞生物学、生物物理等技术和方法，在体调控细胞质膜的脂筏结构或体外建立人工脂筏模型重组PMCA，研究鞘脂、Caveolin等脂筏内含的特异性脂和蛋白与PMCA的相互作用，验证脂筏动态聚集与解聚调控PMCA功能的假说，阐明脂筏调控PMCA功能的分子机理。