应用(FeCo)3Si-SiOx纳米颗粒检测原发性肝癌肿瘤标志物的研究

肝癌的治疗主要依赖于早期诊断，肝癌早期诊断的主要方法有病理学、影像学和肿瘤标志物的检测，前两种方法分别受取材困难和阳性率低等限制，而现有检测肿瘤标志物的方法尚不能解决其敏感性和特异性之间的矛盾。纳米技术的迅速发展为肿瘤标志物的检测提供了新的途径。我们采用前期基于(FeCo)3Si-SiOx磁性纳米颗粒构建的、可检测超低浓度蛋白质的纳米传感器，筛选出与肝癌相关的肿瘤标志物，将其抗体修饰到传感器的不同纳米线上，联合检测具有不同转移能力的肝癌细胞株，把测得的电学信号经傅里叶变换形成数据，进行贝叶斯概率统计，能有效分离盲源，排除干扰，使不同转移能力的肝癌细胞株表现出不同的传导信号。这些信号在经过足量的临床样本验证，以及不断补充和完善后，可构建成具有敏感性高、特异性强，针对肝癌早期诊断的肝癌肿瘤标志物图谱。有望为肝癌的早期诊断提供一个简单、廉价、准确的检测方法，以达到肝癌早期治疗的目的。

肝癌的治疗主要依赖于早期诊断，肝癌早期诊断的主要方法有病理学、影像学和肿瘤标志物的检测，前两种方法分别受取材困难和阳性率低等限制，而现有检测肿瘤标志物的方法尚不能解决其敏感性和特异性之间的矛盾。纳米技术的迅速发展为肿瘤标志物的检测提供了新的途径。我们采用基于(FeCo)3Si-SiOx磁性纳米颗粒构建的、可检测超低浓度蛋白质的纳米传感器，对于含有不同浓度的IL-6重组蛋白的PBS溶液进行了检测，当它经过修正后，I-V曲线出现变形，表示纳米表面颗粒组成是稳定的，不会受电流影响。为了证明高灵敏度SiNW晶体管生物传感器的实际应用，我们效仿ELISA法德原理完成了探测人IL-6的实验，检测到75fM -50pM的IL-6，其结果比ELISA法灵敏20倍，提示我们可以将此应用于极少量生物标本的测量。为了实现高效同时检测我们使用了基于硅纳米线的场效应管纳米生物传感器，同时通过优化纳米生物传感器与蛋白质的连接，增加钝化层厚度(从100nm增加到400nm)，改进微流道结构，实现多标志物联合检测。我们将抗人AFP、AFP-L3、IL-6抗体，通过DCS法修饰在器件的硅纳米线上来进一步明确DSC法对于抗体在器件的硅纳米线上的修饰效果。我们通过以上改进成功联合检测了AFP、AFP-L3 和IL-6：AFP在60pg/ml、600pg/ml和6ng/ml均由信号，AFP-L3在60pg/ml、600pg/ml有较稳定的信号，IL-6在60ng/ml有信号，相同研究目前国内外尚无成功文献报道。若进一步利用这种检测方法可根据与肝癌相关的肿瘤标志物在电阻信号中各自不同的表达特点，以及这些肿瘤标志物与肝癌发生的相关性，为今后进一步联合检测不同转移能力的肝癌细胞株奠定基础。有望为肝癌的早期诊断提供一个简单、廉价、准确的检测方法，以达到肝癌早期治疗的目的。