血管性轻度认知功能损害中miR-26b靶向调控IL6介导小胶质细胞神经毒性

As the possible early stage of vascular dementia, vascular mild cognitive impairment (V-MCI) has recently received widely attention. Basing on the V-MCI rat model, our group observed that chronic post-ischemic microglial activation and proinflammatory cytokines release was related to the progession of V-MCI. In the following study, we could identify downregulation of miR-26b was related to the increase secretion of proinflammatory cytokines during the post-ischemic microglial activation.Therefor, this study is to verify whether downregulated miR-26b can induce the increase expression of inflammatory cytokines(e.g. IL-6 etc.) and the following neuron injury, and whether the rat's cognition improve or even recover, when miR-26b is ectopically expressed in the rat's CA1 region. If this hypothesis can be verified, it will provide significant scientific value to elucidate molecular mechanism of V-MCI progression ,and also provide evidence for seeking new molecular intervention targets.

血管性轻度认知功能损害(V-MCI)作为血管性痴呆可能的前期状态，近年来受到广泛关注。课题组前期以V-MCI 大鼠模型为基础，发现慢性缺血/缺氧后海马CA1区小胶质细胞活化、炎性细胞因子释放与V-MCI发生发展有关。在后续研究中发现miR-26b表达下调与慢性缺血/缺氧诱导小胶质细胞活化过程中炎性细胞因子表达分泌升高有关。申请本课题的研究重点不是小胶质细胞神经毒性作用与V-MCI，而是目前尚属研究空白的调控小胶质细胞炎性因子的差异miRNA。因此本研究拟证明在慢性缺血/缺氧后小胶质细胞miR-26b表达下调可诱导炎性细胞因子IL-6等表达、分泌增加，从而引起神经元损伤。而当V-MCI 大鼠海马CA1 区恢复miR-26b表达后其认知功能可以得到改善或恢复。如果该假设被证实，将对于阐明V-MCI 发生发展的分子调控机制具有重要的科学价值，并为后续寻找V-MCI 新的分子干预靶点提供依据。

小胶质细胞作为中枢神经系统重要的免疫细胞，在脑的缺血缺氧损伤中常处于活化状态。microRNA 是一种内源性小 RNA，不仅参与很多复杂的细胞生物学功能，也在神经退行性疾病、脑血管病等中发挥作用。本课题在前期研究中发现糖氧剥夺的 BV-2细胞中， microRNA-26b 的表达下调。本课题通过过表达、抑制、模拟等技术探讨miRNA-26b对小胶质细胞缺血缺氧模型中的神经毒性作用的调节，并在血管性认知障碍大鼠模型中，初步对miRNA在其中的作用进行了研究。首先，在体外，对小胶质细胞进行糖氧剥夺处理，分析小胶质细胞活化后炎性因子的表达情况、对神经元的毒性作用以及 miR-26b 表达的差异；接着，对miR-26b 进行过表达、抑制、模拟后，小胶质细胞的炎性反应及神经毒性是否改善。同时对 miR-26b 可能的靶基因进行验证。在体内，通过 BCCAO 建立血管性认知障碍大鼠模型，评估低灌注后大鼠海马 CA1 区 miR-26b 表达的差异、小胶质细胞的活化与炎性因子表达情况，以及过表达 miR-26b 后对认知障碍的影响。结果显示，在体外，小胶质细胞经糖氧剥夺处理后发生活化，IL-6 等炎性因子的表达量增加；在体内，BCCAO 可诱导大鼠海马 CA1 区的小胶质细胞活化，IL-6 的表达增加。同时，对小胶质细胞的 miR-26b 过表达，在体内外均可观察到小胶质细胞的炎性反应以及对神经元的毒性作用减轻。在体内，海马 CA1 区 miR-26b 的过表达可改善低灌注后大鼠的认知损害。综上结果，miR-26b 可通过 IL-6 参与调控缺血缺氧诱导的小胶质细胞活化与神经毒性作用。同时，miR-26b 的过表达能改善血管性认知障碍大鼠模型的认知功能。本研究为miRNA-26b在血管性认知障碍的发生发展研究及治疗研究提供了重要的线索。