肿瘤内源性GDF-15通过与DC相互作用诱导肿瘤免疫逃逸的机制研究

荷瘤机体中树突状细胞(DC)的分化和功能发生了重大的变化，是导致肿瘤的免疫逃逸和限制肿瘤免疫治疗的重要因素，目前已知多种肿瘤相关因子参与了这一过程。然而是否还有未知分子参与荷瘤机体中DC分化功能的改变呢？我们课题组前期应用噬菌体展示文库技术对肝癌细胞中可以与DC结合的分子进行全面筛选和鉴定。其中生长分化因子15（GDF-15）在正常肝脏细胞系QZG表达量很低但在肝癌细胞系SMMC-7721培养上清中分泌水平显著升高；并且在DC的培养上清中加入GDF-15能显著抑制未成熟DC表型向成熟DC转化。基于此工作基础，本课题拟通过体外磁珠分离培养DC，流式细胞术，ELISA, 扫描电镜等方法证实肿瘤细胞通过分泌GDF-15抑制DC的分化成熟，诱导DC的失能，从而抑制机体的抗肿瘤免疫应答，并进一步探讨GDF-15抑制DC相互作用的分子机制，阐明肿瘤免疫逃逸的新机理，并为肿瘤免疫治疗提供新的靶点。

荷瘤机体中树突状细胞(DC)的分化和功能发生了重大的变化，是导致肿瘤的免疫逃逸和限制肿瘤免疫治疗的重要因素，目前已知多种肿瘤相关因子参与了这一过程。然而是否还有未知分子参与荷瘤机体中DC分化功能的改变呢？我们课题组前期应用噬菌体展示文库技术对肝癌细胞中可以与DC结合的分子进行全面筛选和鉴定。其中生长分化因子15（GDF-15）在正常肝脏细胞系QZG表达量很低但在肝癌细胞系SMMC-7721培养上清中分泌水平显著升高；并且在DC的培养上清中加入GDF-15能显著抑制未成熟DC表型向成熟DC转化。.本课题为明确GDF-15对DC成熟及功能的影响，通过体外磁珠分离培养CD14+细胞并建立体外诱导DC的体系，进行流式细胞术，ELISA, 扫描电镜等方法结合体内外实验，证实肿瘤细胞通过分泌GDF-15能够抑制DC的分化成熟，诱导DC的失能，从而抑制机体的抗肿瘤免疫应答，促进荷瘤小鼠体内的肿瘤生长。.我们进一步研究了GDF-15抑制DC相互作用的分子机制。通过激光共聚焦、CO-IP、质谱等方法证实GDF-15 通过结合DC 膜表面TGF-βR II而发挥作用，并进一步发现下游分子机制是通过促进Smad通路磷酸化和抑制ERK通路磷酸化来影响DC相关表型分子的改变。 .本研究提示了肿瘤细胞分泌的GDF-15是抑制DC分化、成熟的一个关键分子，GDF15在诱导肿瘤免疫逃逸中起到重要作用。这为肿瘤诱导DC产生免疫耐受提供新的机理，也为阻断肿瘤的免疫逃逸提供新的靶点，为肿瘤的临床诊治提供新的思路和策略。